应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 化学化工区 » 分析 » 色谱质谱 » RP-HPLC分离蛋白质样品怎么出不了峰形好点的峰
71/1返回列表
查看: 1156  |  回复: 6
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

hdfsndy

铁虫 (初入文坛)

[求助] RP-HPLC分离蛋白质样品怎么出不了峰形好点的峰

本人最近在做RP-HPLC分离蛋白质
柱子：C8 孔径  250×4.6mm  300Å
A液： 100% 水     0.1% TFA
B液： 100% 乙腈   0.1% TFA
梯度：0-60min      20%B-100%B
温度：30℃
检测波长：280nm
样品为纯化后的蛋白（还有少量杂蛋白），目的蛋白分子量为21KD，PI为5.8-6.0,图1为空白溶剂，图2为蛋白样品，其中34min出来的可能是个柱子残留的杂质，请高手指导下，十分感谢!

1.jpg



2.jpg
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2012-12-02 20:49:32
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

hdfsndy

铁虫 (初入文坛)
上面发错了，应该是C18的柱子
赞一下 回复此楼
2楼2012-12-02 20:52:37
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

544082769

金虫 (正式写手)

命运-未来！

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
xbqewpq: 金币+1, 感谢应助，欢迎常来分析版交流 2012-12-06 18:11:15
你用的参数是文献中的数据吗？我认为如果参数没错的话，你把流速降低试试。
赞一下 回复此楼
自由的翅膀永远会飞翔的更远。
3楼2012-12-04 10:31:18
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

hdfsndy

铁虫 (初入文坛)
引用回帖:
3楼: Originally posted by 544082769 at 2012-12-04 10:31:18
你用的参数是文献中的数据吗？我认为如果参数没错的话，你把流速降低试试。

首先先谢谢您的回帖！我的蛋白是1个融合蛋白，参数都是自己摸索的，流速0.5ml/min也试过，效果也不好。现在想请问下，哪些参数或条件可以改下，
赞一下(1人) 回复此楼
4楼2012-12-06 09:05:19
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

544082769

金虫 (正式写手)

命运-未来！
溶剂的极性
回复此楼
自由的翅膀永远会飞翔的更远。
5楼2012-12-06 09:20:50
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zizianzi

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★
xbqewpq: 金币+1, 感谢应助，欢迎常来分析版交流 2012-12-06 18:11:24
应该和梯度洗脱有关，如果想得到好的峰型，如果样品很干净可以考虑等度。如果实在必须考虑梯度洗脱，建议在出峰那段时间保持等度试试。
赞一下 回复此楼
6楼2012-12-06 10:59:03
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

hdfsndy

铁虫 (初入文坛)
引用回帖:
5楼: Originally posted by 544082769 at 2012-12-06 09:20:50
溶剂的极性

蛋白的溶剂是PB缓冲液的，不知道可以怎么改下，期待您的回复！
赞一下 回复此楼
7楼2012-12-07 16:41:07
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 hdfsndy 的主题更新
71/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 304求调剂 +4 ahbd 2026-03-14 4/200 2026-03-16 16:48 by 我的船我的海
[考研] 中科院材料273求调剂 +4 yzydy 2026-03-15 4/200 2026-03-16 15:59 by Gaodh_82
[考研] 085600调剂 +5 漾漾123sun 2026-03-12 6/300 2026-03-16 15:58 by 漾漾123sun
[考研] 309求调剂 +5 花与叶@ 2026-03-10 5/250 2026-03-16 14:13 by 哦哦123
[考研] 344求调剂 +3 knight344 2026-03-16 3/150 2026-03-16 09:42 by 无际的草原
[考研] 326求调剂 +4 上岸的小葡 2026-03-15 5/250 2026-03-16 08:39 by Linda Hu
[考研] 311求调剂 +6 冬十三 2026-03-15 6/300 2026-03-16 08:00 by wang_dand
[考研] 289求调剂 +5 步川酷紫123 2026-03-11 5/250 2026-03-15 00:45 by kruisytel
[考研] 材料080500调剂求收留 +3 一颗meteor 2026-03-13 3/150 2026-03-14 10:54 by peike
[考研] 求调剂 +6 yfihxh 2026-03-09 6/300 2026-03-14 01:18 by JourneyLucky
[考研] 0703求调剂 +7 jtyq001 2026-03-10 7/350 2026-03-14 01:06 by JourneyLucky
[考研] 求调剂，一志愿江南大学环境工程085701 +3 Djdjj12 2026-03-10 4/200 2026-03-14 00:31 by JourneyLucky
[考研] 318求调剂 +3 李新光 2026-03-10 3/150 2026-03-14 00:21 by JourneyLucky
[考研] 一志愿西南交大，材料专硕317求调剂 +5 lx8568 2026-03-11 5/250 2026-03-13 21:43 by peike
[考研] 311求调剂 +3 冬十三 2026-03-13 3/150 2026-03-13 20:41 by JourneyLucky
[考研] 求调剂 +5 一定有学上- 2026-03-12 5/250 2026-03-13 18:31 by ms629
[考研] 304求调剂（085602一志愿985） +12 化工人999 2026-03-09 12/600 2026-03-13 12:02 by JourneyLucky
[考研] 296求调剂 +3 大口吃饭 身体健 2026-03-13 3/150 2026-03-13 10:31 by 学员8dgXkO
[考研] 279求调剂 +3 莫xiao 2026-03-10 4/200 2026-03-11 08:06 by 斩魂滴兔子！
[硕博家园] 木虫好像不热闹了，是不是？ +4 偏振片 2026-03-10 4/200 2026-03-10 09:51 by longwave
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭