应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 化学化工区 » 分析 » 色谱质谱 » RP-HPLC分离蛋白质样品怎么出不了峰形好点的峰
51/1返回列表
查看: 1549  |  回复: 6
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

hdfsndy

铁虫 (初入文坛)

[求助] RP-HPLC分离蛋白质样品怎么出不了峰形好点的峰

本人最近在做RP-HPLC分离蛋白质
柱子：C8 孔径  250×4.6mm  300Å
A液： 100% 水     0.1% TFA
B液： 100% 乙腈   0.1% TFA
梯度：0-60min      20%B-100%B
温度：30℃
检测波长：280nm
样品为纯化后的蛋白（还有少量杂蛋白），目的蛋白分子量为21KD，PI为5.8-6.0,图1为空白溶剂，图2为蛋白样品，其中34min出来的可能是个柱子残留的杂质，请高手指导下，十分感谢!

1.jpg



2.jpg
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2012-12-02 20:49:32
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

544082769

金虫 (正式写手)

命运-未来！

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
xbqewpq: 金币+1, 感谢应助，欢迎常来分析版交流 2012-12-06 18:11:15
你用的参数是文献中的数据吗？我认为如果参数没错的话，你把流速降低试试。
赞一下 回复此楼
自由的翅膀永远会飞翔的更远。
3楼2012-12-04 10:31:18
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 7 个回答

hdfsndy

铁虫 (初入文坛)
上面发错了，应该是C18的柱子
赞一下 回复此楼
2楼2012-12-02 20:52:37
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

hdfsndy

铁虫 (初入文坛)
引用回帖:
3楼: Originally posted by 544082769 at 2012-12-04 10:31:18
你用的参数是文献中的数据吗？我认为如果参数没错的话，你把流速降低试试。

首先先谢谢您的回帖！我的蛋白是1个融合蛋白，参数都是自己摸索的，流速0.5ml/min也试过，效果也不好。现在想请问下，哪些参数或条件可以改下，
赞一下(1人) 回复此楼
4楼2012-12-06 09:05:19
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zizianzi

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★
xbqewpq: 金币+1, 感谢应助，欢迎常来分析版交流 2012-12-06 18:11:24
应该和梯度洗脱有关，如果想得到好的峰型，如果样品很干净可以考虑等度。如果实在必须考虑梯度洗脱，建议在出峰那段时间保持等度试试。
赞一下 回复此楼
6楼2012-12-06 10:59:03
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 7 个回答
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考博] 售SCI一区文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可伽急 +3 zSbvVX9JFl9J 2026-11-09 3/150 2026-11-09 21:05 by FChKX8meu1ds
[文学芳草园] 厉娜 +3 张丹枫1991 2026-11-09 5/250 2026-11-09 16:53 by 张丹枫1991
[考博] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O54,科目全,可伽急 +5 kvewwGtKktqB 2026-11-04 12/600 2026-11-09 13:26 by Equinoxhua
[考研] 售SCI-T0P文章，我:8O.5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +5 ttH3f1oA6ace 2026-11-04 15/750 2026-11-09 13:19 by Equinoxhua
[考研] 售SCI文章，我:8O.5.5.1O.54,科目全,可十急 +6 5sJFDKp2kwuI 2026-11-06 14/700 2026-11-09 11:52 by GwrQVVR6Oenx
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.54,科目全,可伽急 +5 5sJFDKp2kwuI 2026-11-06 16/800 2026-11-09 11:47 by GwrQVVR6Oenx
[考博] 售SCI文章，我:8O.5.5.1O.54,科目全,可十急 +5 5sJFDKp2kwuI 2026-11-06 15/750 2026-11-09 11:41 by GwrQVVR6Oenx
[硕博家园] 售SCI一区文章，我:8O5.5.1.O5.4,科目全,可伽急 +4 5sJFDKp2kwuI 2026-11-06 10/500 2026-11-09 08:00 by IhnEQauGmT3K
[考研] 售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.54,科目全,可伽急 +3 5sJFDKp2kwuI 2026-11-06 12/600 2026-11-09 06:32 by l48hFd8Nwae2
[公派出国] 售SCI一区文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可伽急 +4 5sJFDKp2kwuI 2026-11-06 8/400 2026-11-09 00:14 by l48hFd8Nwae2
[教师之家] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可+急 +4 5sJFDKp2kwuI 2026-11-06 8/400 2026-11-08 23:01 by l48hFd8Nwae2
[教师之家] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.5.4,科目全,可+急 +5 5sJFDKp2kwuI 2026-11-06 9/450 2026-11-08 22:46 by l48hFd8Nwae2
[公派出国] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可+急 +5 ttH3f1oA6ace 2026-11-04 10/500 2026-11-06 16:12 by 5sJFDKp2kwuI
[硕博家园] 售SCI一区文章，我:8O5.5.1.O5.4,科目全,可伽急 +4 ttH3f1oA6ace 2026-11-04 11/550 2026-11-06 16:10 by 5sJFDKp2kwuI
[公派出国] 售SCI一区文章，我:8.O.551.O.5.4,科目全,可伽急 +6 ttH3f1oA6ace 2026-11-04 12/600 2026-11-06 16:10 by 5sJFDKp2kwuI
[公派出国] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O54,科目全,可伽急 +5 kvewwGtKktqB 2026-11-04 14/700 2026-11-06 05:10 by qL1cU46YIdK0
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +6 kvewwGtKktqB 2026-11-04 16/800 2026-11-06 05:00 by qL1cU46YIdK0
[考博] 售一区SCI文章T0P，我:8O.551.O54,科目全,可十急 +4 ttH3f1oA6ace 2026-11-04 7/350 2026-11-06 02:13 by qL1cU46YIdK0
[硕博家园] 售SCI-T0P文章，我:8O.5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 ttH3f1oA6ace 2026-11-04 9/450 2026-11-06 02:02 by qL1cU46YIdK0
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章，我:8.O55.1.O.54,科目全,可十急 +4 hNpp4Y2CGvSC 2026-11-04 12/600 2026-11-06 01:53 by qL1cU46YIdK0
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭