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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » QPCR的溶解曲线中的这种小峰是否是非特异性扩增？
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cyofxy

新虫 (初入文坛)

[求助] QPCR的溶解曲线中的这种小峰是否是非特异性扩增？ 已有4人参与

新人刚开始做qpcr，退火温度为58℃时，发现有一个目的基因的溶解曲线的主峰前面有一个小峰，把退火温度提高到60℃后仍然有一个小峰，其他基因没有这个情况。请教一下各位前辈，这种峰是反应了非特异性扩增么？这种情况是重新设计引物，还是先跑胶，明确是否有非特异性扩增后再考虑要不要重新设计引物？
谢谢各位啦！

这张是58℃：



这张是60℃：


再次感谢各位！

QPCR的溶解曲线中的这种小峰是否是非特异性扩增？
1.jpg


QPCR的溶解曲线中的这种小峰是否是非特异性扩增？-1
2.jpg
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1楼 2014-10-07 19:50:27
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周硕

铁虫 (初入文坛)
非特异峰不明显，结果应该比较可信。
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7楼2014-10-11 09:11:16
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