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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 生物化学 » 求助：琼脂糖凝胶电泳条带分析
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Eviler16

木虫 (正式写手)

[求助] 求助：琼脂糖凝胶电泳条带分析 已有7人参与

http://image.keyan.cc/data/bcs/2 ... _1410625402_154.jpg
如图：为什么红框圈出来的条带这么丑呢？理论上应该是一条条带的，结果不知道怎么回事，总是跑出来那么丑，请各位前辈帮忙分析分析，到底是哪里出错了？

求助：琼脂糖凝胶电泳条带分析
111.jpg
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1楼 2014-09-14 00:26:58
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bwangel

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
Eviler16: 金币+3, ★★★很有帮助, THX 2014-09-14 19:50:33
myprayer: 金币+1, 赠人玫瑰手有余香，分子生物期待你更多精彩。 2014-09-14 23:51:11
红框的可能是蛋白什么的残留，不用管它，我觉得你的带很好啊，带多是引物的问题
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2楼2014-09-14 09:41:12
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yesucao

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
myprayer: 金币+1, 赠人玫瑰手有余香，分子生物期待你更多精彩。 2014-09-14 23:51:18
红框中是没有跑出孔的杂质，蛋白之类的，不用担心。
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3楼2014-09-14 10:49:18
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bragren123

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
Eviler16: 金币+3, ★★★很有帮助, THX 2014-09-14 20:03:02
myprayer: 金币+1, 赠人玫瑰手有余香，分子生物期待你更多精彩。 2014-09-14 23:51:25
这个现象比较常见，有蛋白质污染，但在不影响条带回收情况下，可以不必理会，如果杂志造成DNA溶解度低，就要重新纯化了
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4楼2014-09-14 14:50:13
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li245824369

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
myprayer: 金币+1, 赠人玫瑰手有余香，分子生物期待你更多精彩。 2014-09-14 23:51:32
这是有污染，可用高盐除去污染！就不会这样了！
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5楼2014-09-14 14:54:05
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wangranjun

荣誉版主 (知名作家)

广庭之惘然

优秀版主

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
myprayer: 金币+1, 赠人玫瑰手有余香，分子生物期待你更多精彩。 2014-09-14 23:51:40
上样孔有蛋白残留，不用担心！你的产物主条带很亮，这就足够了，其余的条带可能是引物特异性不好，或者退火温度不合适
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他日扬翼九万里，历大千世界，定我红尘心！
6楼2014-09-14 18:42:04
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Eviler16

木虫 (正式写手)
引用回帖:
2楼: Originally posted by bwangel at 2014-09-14 09:41:12
红框的可能是蛋白什么的残留，不用管它，我觉得你的带很好啊，带多是引物的问题

我还是有些疑问，如果是蛋白残留而不是我需要的条带的话，那么结果就跟理论上不一致了，而且为什么残留的每个泳道的强弱都相差这么大呢？文献上红框框出来的应该是单一的条带，还请前辈解惑
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7楼2014-09-14 19:50:21
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Eviler16

木虫 (正式写手)
引用回帖:
4楼: Originally posted by bragren123 at 2014-09-14 14:50:13
这个现象比较常见，有蛋白质污染，但在不影响条带回收情况下，可以不必理会，如果杂志造成DNA溶解度低，就要重新纯化了

其实理论上红框部分应该是一条单一条带的，样品处理的时候，按照protocol的做法，使用氯仿萃取，然后取水层上样的，而且令我困惑的是，如果是蛋白质污染的话，为什么每个条带污染的程度会不一样呢？
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8楼2014-09-14 20:02:48
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bwangel

银虫 (小有名气)
引用回帖:
7楼: Originally posted by Eviler16 at 2014-09-14 19:50:21
我还是有些疑问，如果是蛋白残留而不是我需要的条带的话，那么结果就跟理论上不一致了，而且为什么残留的每个泳道的强弱都相差这么大呢？文献上红框框出来的应该是单一的条带，还请前辈解惑...

残留的每个泳道的强弱都相差这么大,请问你的模板是不是一样的，不一样相差大很正常
条带不一致，原因我也解答不了，你真的要去追寻原因就去测序去，看到测序结果就知道原因了，
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9楼2014-09-15 10:18:23
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Eviler16

木虫 (正式写手)
引用回帖:
9楼: Originally posted by bwangel at 2014-09-15 10:18:23
残留的每个泳道的强弱都相差这么大,请问你的模板是不是一样的，不一样相差大很正常
条带不一致，原因我也解答不了，你真的要去追寻原因就去测序去，看到测序结果就知道原因了，...

好吧，Thank you
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10楼2014-09-15 19:57:53
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