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北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
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Eviler16

木虫 (正式写手)

[求助] 求助:琼脂糖凝胶电泳条带分析 已有7人参与

http://image.keyan.cc/data/bcs/2 ... _1410625402_154.jpg
如图:为什么红框圈出来的条带这么丑呢?理论上应该是一条条带的,结果不知道怎么回事,总是跑出来那么丑,请各位前辈帮忙分析分析,到底是哪里出错了?

求助:琼脂糖凝胶电泳条带分析
111.jpg
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bwangel

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
Eviler16: 金币+3, ★★★很有帮助, THX 2014-09-14 19:50:33
myprayer: 金币+1, 赠人玫瑰手有余香,分子生物期待你更多精彩。 2014-09-14 23:51:11
红框的可能是蛋白什么的残留,不用管它,我觉得你的带很好啊,带多是引物的问题
2楼2014-09-14 09:41:12
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yesucao

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
myprayer: 金币+1, 赠人玫瑰手有余香,分子生物期待你更多精彩。 2014-09-14 23:51:18
红框中是没有跑出孔的杂质,蛋白之类的,不用担心。
3楼2014-09-14 10:49:18
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bragren123

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
Eviler16: 金币+3, ★★★很有帮助, THX 2014-09-14 20:03:02
myprayer: 金币+1, 赠人玫瑰手有余香,分子生物期待你更多精彩。 2014-09-14 23:51:25
这个现象比较常见,有蛋白质污染,但在不影响条带回收情况下,可以不必理会,如果杂志造成DNA溶解度低,就要重新纯化了
4楼2014-09-14 14:50:13
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li245824369

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
myprayer: 金币+1, 赠人玫瑰手有余香,分子生物期待你更多精彩。 2014-09-14 23:51:32
这是有污染,可用高盐除去污染!就不会这样了!
5楼2014-09-14 14:54:05
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wangranjun

荣誉版主 (知名作家)

广庭之惘然

优秀版主

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
myprayer: 金币+1, 赠人玫瑰手有余香,分子生物期待你更多精彩。 2014-09-14 23:51:40
上样孔有蛋白残留,不用担心!你的产物主条带很亮,这就足够了,其余的条带可能是引物特异性不好,或者退火温度不合适
他日扬翼九万里,历大千世界,定我红尘心!
6楼2014-09-14 18:42:04
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Eviler16

木虫 (正式写手)

引用回帖:
2楼: Originally posted by bwangel at 2014-09-14 09:41:12
红框的可能是蛋白什么的残留,不用管它,我觉得你的带很好啊,带多是引物的问题

我还是有些疑问,如果是蛋白残留而不是我需要的条带的话,那么结果就跟理论上不一致了,而且为什么残留的每个泳道的强弱都相差这么大呢?文献上红框框出来的应该是单一的条带,还请前辈解惑
7楼2014-09-14 19:50:21
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Eviler16

木虫 (正式写手)

引用回帖:
4楼: Originally posted by bragren123 at 2014-09-14 14:50:13
这个现象比较常见,有蛋白质污染,但在不影响条带回收情况下,可以不必理会,如果杂志造成DNA溶解度低,就要重新纯化了

其实理论上红框部分应该是一条单一条带的,样品处理的时候,按照protocol的做法,使用氯仿萃取,然后取水层上样的,而且令我困惑的是,如果是蛋白质污染的话,为什么每个条带污染的程度会不一样呢?
8楼2014-09-14 20:02:48
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bwangel

银虫 (小有名气)

引用回帖:
7楼: Originally posted by Eviler16 at 2014-09-14 19:50:21
我还是有些疑问,如果是蛋白残留而不是我需要的条带的话,那么结果就跟理论上不一致了,而且为什么残留的每个泳道的强弱都相差这么大呢?文献上红框框出来的应该是单一的条带,还请前辈解惑...

残留的每个泳道的强弱都相差这么大,请问你的模板是不是一样的,不一样相差大很正常
条带不一致,原因我也解答不了,你真的要去追寻原因就去测序去,看到测序结果就知道原因了,
9楼2014-09-15 10:18:23
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Eviler16

木虫 (正式写手)

引用回帖:
9楼: Originally posted by bwangel at 2014-09-15 10:18:23
残留的每个泳道的强弱都相差这么大,请问你的模板是不是一样的,不一样相差大很正常
条带不一致,原因我也解答不了,你真的要去追寻原因就去测序去,看到测序结果就知道原因了,...

好吧,Thank you
10楼2014-09-15 19:57:53
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