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PCR退火温度为什么要设置程序升温？ 已有3人参与
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| 最近做PCR，文献中的PCR条件中退火温度是50~60°C，1min，很不明白这个温度条件是什么意思，在PCR仪上要怎么设定？ |
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 核酸生物学实验经验 |
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9楼2014-08-21 09:05:49
ksws0465326
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【答案】应助回帖
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感谢参与，应助指数 +1
淡水三年: 金币+5, ★★★很有帮助 2014-08-19 19:34:46
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| 是退火温度梯度实验吧，同一个体系下，不同的退火温度，可能会有不同的结果条带，看在哪个温度下扩增的最好，条带清晰单一，在合成一个新的质粒或基因组插入片段之类的，有时会应用到退火温度梯度实验，和引物浓度梯度，模板浓度梯度等等，根据实际情况而定。至于怎么设定，有可以做这个的PCR仪，设置一个最低退火温度，和一个最高的退火温度，每一个竖排都是一个温度，把样品放入你想用的温度里就行，如果没有这种PCR仪，只能多用几台PCR仪了，每台设定不同的退火温度进行试验。希望对你有所帮助。 |
2楼2014-08-18 20:17:05
3楼2014-08-18 22:38:23
4楼2014-08-19 07:57:11
40