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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » RNA样品的纯度与完整性问题
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shuai2167

新虫 (初入文坛)

[求助] RNA样品的纯度与完整性问题已有2人参与

本人始终没有搞懂，既然已经用OD260/OD280来检测RNA样品的纯度了，为什么还要用电泳来检测RNA的完整性呢，RNA的完整性不也是来说明RNA有没有降解的嘛？这样不就重复了嘛？请问，这样做到底是为了什么呢？纯度与完整性有何区别呢？
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有梦想的人，就是美丽的，就是指的尊敬的
1楼2014-08-13 20:38:36
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冷雁孤旅

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
同意楼上说的，以前看过一篇文献，有机溶剂的存在可以降低OD值 如果你的RNA降解OD比值大于2 然而有机溶剂的存在可以降低比值 有可能将你的OD比值拉回1.8-2.0 所以 电泳和测分光都是必须的。
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生命不息奋斗不止
3楼2014-08-13 23:30:51
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ssssllllnnnn

至尊木虫 (知名作家)

Translator and Proofreader

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
是两回事：
1、纯度：你所分离到的RNA是否混有其他东西，特别是蛋白质等。RNA可以很纯，但可能有严重降解。
2、完整性：是鉴定所抽提RNA是否完整的指标，也就是看RNA有没有降解。RNA可以很完整，但却可以不纯。
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2楼2014-08-13 23:14:15
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shuai2167

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by ssssllllnnnn at 2014-08-13 23:14:15
是两回事：
1、纯度：你所分离到的RNA是否混有其他东西，特别是蛋白质等。RNA可以很纯，但可能有严重降解。
2、完整性：是鉴定所抽提RNA是否完整的指标，也就是看RNA有没有降解。RNA可以很完整，但却可以不纯。

那是不是就是说，OD260测的值包括完整的RNA ，也包括RNA降解产物如核苷酸、核苷、碱基等嘛？
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有梦想的人，就是美丽的，就是指的尊敬的
4楼2014-08-14 11:44:06
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ssssllllnnnn

至尊木虫 (知名作家)

Translator and Proofreader

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
shuai2167: 金币+20, ★★★很有帮助 2014-08-14 23:47:33
对的，是这个样子的。
总算没有疑虑了？
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5楼2014-08-14 11:50:56
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