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shuai2167

新虫 (初入文坛)

[求助] RNA样品的纯度与完整性问题 已有2人参与

本人始终没有搞懂,既然已经用OD260/OD280来检测RNA样品的纯度了,为什么还要用电泳来检测RNA的完整性呢,RNA的完整性不也是来说明RNA有没有降解的嘛?这样不就重复了嘛?请问,这样做到底是为了什么呢?纯度与完整性有何区别呢?
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ssssllllnnnn

至尊木虫 (知名作家)

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【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
是两回事:
1、纯度:你所分离到的RNA是否混有其他东西,特别是蛋白质等。RNA可以很纯,但可能有严重降解。
2、完整性:是鉴定所抽提RNA是否完整的指标,也就是看RNA有没有降解。RNA可以很完整,但却可以不纯。
2楼2014-08-13 23:14:15
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冷雁孤旅

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
同意楼上说的,以前看过一篇文献,有机溶剂的存在可以降低OD值 如果你的RNA降解OD比值大于2 然而有机溶剂的存在可以降低比值 有可能将你的OD比值拉回1.8-2.0 所以 电泳和测分光都是必须的。
生命不息奋斗不止
3楼2014-08-13 23:30:51
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shuai2167

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by ssssllllnnnn at 2014-08-13 23:14:15
是两回事:
1、纯度:你所分离到的RNA是否混有其他东西,特别是蛋白质等。RNA可以很纯,但可能有严重降解。
2、完整性:是鉴定所抽提RNA是否完整的指标,也就是看RNA有没有降解。RNA可以很完整,但却可以不纯。

那是不是就是说,OD260测的值包括完整的RNA ,也包括RNA降解产物如核苷酸、核苷、碱基等嘛?
有梦想的人,就是美丽的,就是指的尊敬的
4楼2014-08-14 11:44:06
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ssssllllnnnn

至尊木虫 (知名作家)

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【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
shuai2167: 金币+20, ★★★很有帮助 2014-08-14 23:47:33
对的,是这个样子的。
总算没有疑虑了?
5楼2014-08-14 11:50:56
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