应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » 请教DNA电泳的浓度及电压时间设置
121/2返回列表12下一页
查看: 8515  |  回复: 11
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

Insecta_A

铜虫 (小有名气)

[求助] 请教DNA电泳的浓度及电压时间设置 已有5人参与

大家好，我PCR产物预计大小在90—200左右，请问我用琼脂糖电泳时胶的浓度选择多少？同时电泳时的电压以及时间？谢谢！
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2014-08-13 08:58:53
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

ssssllllnnnn

至尊木虫 (知名作家)

Translator and Proofreader

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
Insecta_A: 金币+2, ★有帮助 2014-08-13 10:42:01
gyesang: 金币+2, 鼓励回帖交流！ 2014-08-13 12:29:26
用2%～2.5%便可。
电压90V就可以了，不要太高。
时间半小时内（20～30min应该就可以了，可以经常看看）
赞一下(1人) 回复此楼
2楼2014-08-13 09:14:59
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

盛夏海棠

木虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
Insecta_A: 金币+1, ★有帮助 2014-08-13 10:42:09
gyesang: 金币+2, 鼓励回帖交流！ 2014-08-13 12:29:33
PCR产物片段越小跑的越快，需要用浓度高些的胶，2%就可以，电压高的话跑的也快，一般loading buffer会有指示作用，一般跑到胶的一半时就可以看结果了
赞一下(1人) 回复此楼
天道酬勤
3楼2014-08-13 09:18:01
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

hbsdz

新虫 (小有名气)
引用回帖:
5楼: Originally posted by Insecta_A at 2014-08-22 10:30:01
请问，我一般用微波炉中火打2分钟左右，我感觉微波炉在加热的时候会蒸发，如果做2%的胶（0.7g+35ml 1X TAE）是不是真实的胶浓度就会高一些，所以我想请问你平时在做的时候，大概会多加多少ml的缓冲液来弥补蒸发的损 ...

我也是用的2分钟微波炉加热，我一般多加2-4mL的1X TAE溶液。110V  20----25分钟左右。希望可以帮到你。
赞一下(1人) 回复此楼
我的邮箱：hbsdzml@163.com
11楼2014-09-10 11:10:02
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
普通回帖

ncuduhan

银虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
gyesang: 金币+2, 鼓励回帖交流！ 2014-08-13 12:29:48
Insecta_A: 金币+1, ★有帮助 2014-08-13 20:45:35
琼脂糖浓度/％         0.3         0.6         0.7         0.9         1.2         1.5         2.0
线状DNA大小/kb         60－5         20－1         10－0.8         7－0.5         6－0.4         4－0.2         3－0.1
赞一下 回复此楼
4楼2014-08-13 12:13:45
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

Insecta_A

铜虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by ssssllllnnnn at 2014-08-13 09:14:59
用2%～2.5%便可。
电压90V就可以了，不要太高。
时间半小时内（20～30min应该就可以了，可以经常看看）

请问，我一般用微波炉中火打2分钟左右，我感觉微波炉在加热的时候会蒸发，如果做2%的胶（0.7g+35ml 1X TAE）是不是真实的胶浓度就会高一些，所以我想请问你平时在做的时候，大概会多加多少ml的缓冲液来弥补蒸发的损失？
赞一下 回复此楼
5楼2014-08-22 10:30:01
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

ssssllllnnnn

至尊木虫 (知名作家)

Translator and Proofreader
引用回帖:
5楼: Originally posted by Insecta_A at 2014-08-21 14:30:01
请问，我一般用微波炉中火打2分钟左右，我感觉微波炉在加热的时候会蒸发，如果做2%的胶（0.7g+35ml 1X TAE）是不是真实的胶浓度就会高一些，所以我想请问你平时在做的时候，大概会多加多少ml的缓冲液来弥补蒸发的损 ...

两分钟是不是太长了？微波炉的功率多大？
一般不需要这么长时间。只要看到开了就停下来，摇动一会。过几分钟基本就可以了。如果仍然没有完全溶解，则可以继续加热一会，仍然不需要长时间处于沸腾状态。
赞一下 回复此楼
6楼2014-08-22 10:36:05
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

Hliotrope

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★
Insecta_A: 金币+1, ★有帮助 2014-08-22 15:53:48
2%胶，140V以内就行，电压高跑的快一些，Loading Buffer电泳速度与300bp大小DNA速度一样，所以别让loading buffer跑太前，跑到胶一半处就差不多了。。。
赞一下 回复此楼
Someone
7楼2014-08-22 11:05:31
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

Insecta_A

铜虫 (小有名气)
引用回帖:
6楼: Originally posted by ssssllllnnnn at 2014-08-22 10:36:05
两分钟是不是太长了？微波炉的功率多大？
一般不需要这么长时间。只要看到开了就停下来，摇动一会。过几分钟基本就可以了。如果仍然没有完全溶解，则可以继续加热一会，仍然不需要长时间处于沸腾状态。...

用的中火，你们一般是怎样做的呢
赞一下 回复此楼
8楼2014-08-22 15:53:20
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

清晨甲壳虫

铜虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★
Insecta_A(西门吹雪170代发): 金币+1, 鼓励回帖交流 2014-09-10 18:14:18
我们常用 1%琼脂糖凝胶，电压130∨电压。具体取决于核酸片段大小，浮动应该不大～

[ 发自小木虫客户端 ]
赞一下 回复此楼
9楼2014-08-22 16:15:15
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

清晨甲壳虫

铜虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★
Insecta_A(西门吹雪170代发): 金币+1, 鼓励回帖交流 2014-09-10 18:14:30
超纯水加入琼脂糖之后，微波炉中高火五分钟左右，看到底部沸腾气泡即可～

[ 发自小木虫客户端 ]
赞一下 回复此楼
10楼2014-08-22 16:17:05
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 Insecta_A 的主题更新
121/2返回列表12下一页
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 国自然面上复盘~欢迎讨论 (金币+5) +11 晴天加油 2026-08-26 12/600 2026-08-28 01:22 by li09465290@
[基金申请] 为什么资助数各大高校都创新高，自己申请怎么就这么难 +9 Kittylucky 2026-08-27 9/450 2026-08-28 01:08 by jurkat.1640
[基金申请] 哪位高人中了，把查询到的截图贴出来让我看看，让我长长见识 +5 yuleib84 2026-08-26 6/300 2026-08-28 00:02 by yudaoqian88
[教师之家] 售SCI文章，我:8O5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 XLGfUIdOmEAO 2026-08-27 4/200 2026-08-27 22:26 by 3RAFyYXYSwGS
[基金申请] 基金不中，共勉 +10 eulota 2026-08-26 10/500 2026-08-27 17:23 by lqllinqiaoli
[基金申请] 基金未中，这种答复是模板吗？ +5 zhaosm1982 2026-08-27 6/300 2026-08-27 16:00 by lfy8008
[基金申请] 怎么看青基中了没有啊 +5 叶九微 2026-08-26 5/250 2026-08-27 10:35 by l_zh2008
[教师之家] 售SCI一区文章，我:8.O.551.O.5.4,科目全,可伽急 +3 LIbGuocjEEYw 2026-08-26 4/200 2026-08-27 04:33 by Ie9AyIAvGbvs
[基金申请] 2026年的国家社科基金项目通讯评审的新规则与新动向、新挑战 +7 process2012 2026-08-23 10/500 2026-08-26 19:23 by hmhminy
[基金申请] 范进中举一文的中心思想 +9 炎黄贵胄 2026-08-22 10/500 2026-08-26 15:40 by semaglutide
[基金申请] 2026国自然函评费到账 +22 羊腰板 2026-08-21 25/1250 2026-08-26 15:00 by zuocuiping
[基金申请] 能否退出参与的面上项目解除限项 +23 koalala 2026-08-24 26/1300 2026-08-26 14:29 by 宝贝虫子
[基金申请] 出来了 +9 trojank 2026-08-26 9/450 2026-08-26 14:25 by 宝贝虫子
[基金申请] 国际合作可查了，中了面上 (EPI+1)(金币+50) +18 Ldrop2023 2026-08-26 18/900 2026-08-26 11:15 by cmrandy
[职场人生] 学生撞见辅导员送外卖，第二天全班都沉默了 +3 鲸鱼融金_浙江_� 2026-08-22 3/150 2026-08-26 09:01 by zzuzxg
[基金申请] 在坚冰还盖着北海的时候，我看到了怒放的梅花。 (金币+10) +6 ziyangfang 2026-08-25 9/450 2026-08-25 20:26 by huagongfeihu
[基金申请] 如果此刻你正在为国基感到焦虑，不妨来听听这首《基金之外》 +8 scalable 2026-08-24 8/400 2026-08-25 12:52 by jnhyjjm
[基金申请] 人气不行了 +11 fansofjerry 2026-08-21 11/550 2026-08-25 11:04 by 孤独的英雄6
[教师之家] 跳槽后在研项目怎么办？ +5 简单化xn 2026-08-22 10/500 2026-08-23 12:38 by 简单化xn
[基金申请] 应该是下周三26日公布了吧？ +4 哈哈蛤？ 2026-08-21 4/200 2026-08-21 10:58 by Vivilian
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭