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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » 请教DNA电泳的浓度及电压时间设置
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Insecta_A

铜虫 (小有名气)

[求助] 请教DNA电泳的浓度及电压时间设置 已有5人参与

大家好，我PCR产物预计大小在90—200左右，请问我用琼脂糖电泳时胶的浓度选择多少？同时电泳时的电压以及时间？谢谢！
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1楼 2014-08-13 08:58:53
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ncuduhan

银虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
gyesang: 金币+2, 鼓励回帖交流！ 2014-08-13 12:29:48
Insecta_A: 金币+1, ★有帮助 2014-08-13 20:45:35
琼脂糖浓度/％         0.3         0.6         0.7         0.9         1.2         1.5         2.0
线状DNA大小/kb         60－5         20－1         10－0.8         7－0.5         6－0.4         4－0.2         3－0.1
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4楼2014-08-13 12:13:45
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ssssllllnnnn

至尊木虫 (知名作家)

Translator and Proofreader

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
Insecta_A: 金币+2, ★有帮助 2014-08-13 10:42:01
gyesang: 金币+2, 鼓励回帖交流！ 2014-08-13 12:29:26
用2%～2.5%便可。
电压90V就可以了，不要太高。
时间半小时内（20～30min应该就可以了，可以经常看看）
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2楼2014-08-13 09:14:59
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盛夏海棠

木虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
Insecta_A: 金币+1, ★有帮助 2014-08-13 10:42:09
gyesang: 金币+2, 鼓励回帖交流！ 2014-08-13 12:29:33
PCR产物片段越小跑的越快，需要用浓度高些的胶，2%就可以，电压高的话跑的也快，一般loading buffer会有指示作用，一般跑到胶的一半时就可以看结果了
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天道酬勤
3楼2014-08-13 09:18:01
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Insecta_A

铜虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by ssssllllnnnn at 2014-08-13 09:14:59
用2%～2.5%便可。
电压90V就可以了，不要太高。
时间半小时内（20～30min应该就可以了，可以经常看看）

请问，我一般用微波炉中火打2分钟左右，我感觉微波炉在加热的时候会蒸发，如果做2%的胶（0.7g+35ml 1X TAE）是不是真实的胶浓度就会高一些，所以我想请问你平时在做的时候，大概会多加多少ml的缓冲液来弥补蒸发的损失？
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5楼2014-08-22 10:30:01
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