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yangxia12390

银虫 (小有名气)

[交流] 膜蛋白的原核表达

各位大神,我想请教一个关于膜蛋白原核表达的问题,我要做的是一个未知蛋白,预测跨膜区有两个,全长的基因是649个碱基,全长已经连在PET28a上了,但是用BL菌株转化了以后不表达,所以打算做跨膜区的截短试试,看能不能表达,如果做截短该如何做?截了以后会不会表达出来就不是我的原始蛋白了?
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ssssllllnnnn

至尊木虫 (知名作家)

Translator and Proofreader


★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
yangxia12390: 金币+2 2014-07-28 15:54:18
自己做的载体?编码序列有无问题?
如何判断有无表达?染色?还是Western blot?
用IPTG诱导的浓度是多少?在什么温度条件下 ?
蛋白纯化过程大致如何?变性还是没有变性?若无变性是否没有检测包涵体内的蛋白?
信息不够,无法判断。
6楼2014-07-25 09:55:51
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1141998388

木虫 (著名写手)


yangxia12390: 金币+1 2014-07-24 10:37:41
小小刘靖

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
要做科研,请先做人。要做人,请先做一个有人品,
2楼2014-07-24 10:36:45
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1141998388

木虫 (著名写手)

哇哈哈

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
要做科研,请先做人。要做人,请先做一个有人品,
3楼2014-07-24 10:36:57
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pypsak

金虫 (正式写手)

★ ★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
yangxia12390: 金币+3 2014-07-24 20:38:00
表达出来也是包涵体,估计,还是用真核吧,如果对细胞无毒的话
4楼2014-07-24 14:08:53
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