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yangxia12390

银虫 (小有名气)

[交流] 膜蛋白的原核表达

各位大神,我想请教一个关于膜蛋白原核表达的问题,我要做的是一个未知蛋白,预测跨膜区有两个,全长的基因是649个碱基,全长已经连在PET28a上了,但是用BL菌株转化了以后不表达,所以打算做跨膜区的截短试试,看能不能表达,如果做截短该如何做?截了以后会不会表达出来就不是我的原始蛋白了?
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至尊木虫 (知名作家)

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★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
yangxia12390: 金币+2 2014-07-28 15:54:18
自己做的载体?编码序列有无问题?
如何判断有无表达?染色?还是Western blot?
用IPTG诱导的浓度是多少?在什么温度条件下 ?
蛋白纯化过程大致如何?变性还是没有变性?若无变性是否没有检测包涵体内的蛋白?
信息不够,无法判断。
6楼2014-07-25 09:55:51
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