应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » SSR群体不出带
51/1返回列表
查看: 1536  |  回复: 4
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

苹果的把儿

金虫 (初入文坛)

[求助] SSR群体不出带 已有3人参与

大家好，我目前在做SSR的实验，前筛出100多对具有多态性的引物，筛引物时用的是两个亲本和10个后代。最近正在上群体，大概300多份材料，但是许多引物都跑不出带来，而这些引物前期筛选时表现特别好。340多个群体有的有的只出几个，有的出一半。有时甚至亲本都不出带，用的是非变性聚丙烯凝胶电泳。marker每次都很好，应该不是做胶和染色的问题。现在怀疑是PCR的问题，但是想到的因素又都一一排除了。老师很着急要结果。请问有没有这方面经验的高手，给指点一下呗，不胜感谢！拜托拜托！

SSR群体不出带
这是筛引物时的图片，前两个是亲本，后面是后代


SSR群体不出带-1
这是这个引物上群体的照片（部分群体），前两个为亲本
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2014-07-16 16:22:29
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

泰州木虫

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
苹果的把儿(西门吹雪170代发): 金币+2, 鼓励回帖交流 2014-08-16 12:51:51
你确定DNA模板没有问题么？看这有的出带，有的没有，貌似是模板的质量问题啊。
还有就是引物有的时候，长时间4度保存也会有影响。
意见仅供参考
赞一下 回复此楼
just do it!
3楼2014-08-14 12:50:02
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 5 个回答

liweiwei0812

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★
苹果的把儿(西门吹雪170代发): 金币+1, 鼓励回帖交流 2014-08-16 12:52:04
先挑一对有问题的引物，重新合成一下，用新引物实验看还有没有问题，如果还是有问题，就要怀疑模板的事儿了，是不是含杂质太多抑制了PCR反应？或者换一支新酶。
赞一下 回复此楼
4楼2014-08-15 15:57:04
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yangxy04

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

根据电泳结果来看，同一引物PCR后的结果中部分结果无条带，推测是DNA模板出现问题（可能纯度差或浓度特别低）。建议核酸提纯后，分别用核酸蛋白仪和电泳的方式对核酸进行质量检测，合格了再进行PCR扩增。
如果题主材料样本量多，需要进行PCR筛检的话，可以考虑采用直接PCR的方式进行检测。省去了核酸提取 的步骤，可以节约你的时间，减少劳动量。目前，福际、thermo、omega等公司都有相应的试剂盒。
祝你实验顺利。
赞一下 回复此楼
5楼2014-08-20 16:15:57
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 5 个回答
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章，我:8.O55.1.O.54,科目全,可十急 +6 s3fFTmArrBt6 2026-09-14 6/300 2026-09-18 10:16 by yS4CkeWDhD6V
[有机交流] 各位大神，目前国内有哪些比较好用的逆合成软件？ 20+3 zapen 2026-09-15 8/400 2026-09-18 10:14 by tianliang0414
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O54,科目全,可伽急 +6 QUjhNVAcOSff 2026-09-13 6/300 2026-09-18 08:54 by yS4CkeWDhD6V
[考研] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 C79jjtjAKjEn 2026-09-15 3/150 2026-09-18 03:40 by cITaGg3p5edr
[公派出国] 售SCI文章，我:8O5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 vZfe6xYu34yj 2026-09-14 3/150 2026-09-18 02:06 by cITaGg3p5edr
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O54,科目全,可伽急 +5 23jxep3nCNZb 2026-09-14 5/250 2026-09-17 13:53 by ObVzqQQh1rrE
[硕博家园] 售SCI一区文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可伽急 +6 40ms4Wlo4umh 2026-09-14 6/300 2026-09-17 13:53 by ObVzqQQh1rrE
[考研] 售SCI一区文章，我:8O5.5.1.O5.4,科目全,可伽急 +5 23jxep3nCNZb 2026-09-14 5/250 2026-09-17 13:29 by ObVzqQQh1rrE
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.54,科目全,可伽急 +6 23jxep3nCNZb 2026-09-14 6/300 2026-09-17 13:27 by ObVzqQQh1rrE
[找工作] 售SCI一区文章，我:8O5.5.1.O5.4,科目全,可伽急 +8 3n8v2C8RimXI 2026-09-13 8/400 2026-09-17 11:27 by UAIjTRMuUFoj
[考博] 售SCI-T0P文章，我:8O.5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 vZfe6xYu34yj 2026-09-14 3/150 2026-09-17 05:38 by k06BKNblrGRH
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 6F5UbRU2I5hL 2026-09-14 3/150 2026-09-17 03:16 by Tql5LQhh5rLK
[考研] 售SCI文章，我:8O5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +6 6F5UbRU2I5hL 2026-09-14 6/300 2026-09-17 03:14 by Tql5LQhh5rLK
[公派出国] 售SCI文章，我:8O.5.5.1O.54,科目全,可十急 +6 s3fFTmArrBt6 2026-09-14 6/300 2026-09-17 02:38 by Tql5LQhh5rLK
[公派出国] 售SCI-T0P文章，我:8O.5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +4 LwdutQ8HoqWP 2026-09-13 7/350 2026-09-17 02:02 by Tql5LQhh5rLK
[考研] 售SCI一区文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可伽急 +3 vZfe6xYu34yj 2026-09-14 3/150 2026-09-16 22:26 by Tql5LQhh5rLK
[考研] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.5.4,科目全,可+急 +4 s3fFTmArrBt6 2026-09-13 6/300 2026-09-16 16:00 by i3KBRD19ERkG
[考研] 售SCI文章，我:8O5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +4 40ms4Wlo4umh 2026-09-14 4/200 2026-09-16 06:36 by LH5NkK5Ud4bh
[考博] 售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +6 s3fFTmArrBt6 2026-09-14 7/350 2026-09-15 16:47 by CgyNCDVNhGVg
[教师之家] 售SCI一区文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可伽急 +4 s3fFTmArrBt6 2026-09-13 4/200 2026-09-15 06:50 by 5BDX0d0WFp7t
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭