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nakamori0319

金虫 (小有名气)

[求助] 关于发酵罐染菌,求助

我做的菌种发酵周期较长,长得比较慢,发酵周期差不多140 h。在上发酵罐的时候发现,每一罐都在三天左右染菌。做了空白罐(不接种,不取样),同样染菌。感觉应该不是发酵罐密封性的原因吧,毕竟罐子那么贵。。。好无助,求大家帮忙分析一下原因。。。
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大肠杆菌工程菌发酵

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reallpf

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
nakamori0319: 金币+10, ★★★很有帮助 2014-07-14 10:51:56
引用回帖:
3楼: Originally posted by nakamori0319 at 2014-07-13 23:04:05
培养基中含有2.5g/L的磷酸氢二钾和2.5的磷酸二氢钾,1的氯化镁和1的氯化钙,灭菌前是澄清的,但是灭菌后就有很多沉淀了,有沉淀会不会造成灭菌不彻底呢?如果灭菌不彻底的话,会在60h才染菌么?非常感谢您的帮助啊...

灭菌后有沉淀是正常的,磷酸钙微溶。
不接种也会染菌,那肯定是发酵罐的问题了。
先主要检查3个方面:
1. 一定要先空消,然后再实消。灭菌过程中注意下发酵罐的气压和温度。
2. 检查一下夹套是否漏水。
3. 检查所有气芯,接口。特别是通气口气塞。

同时对整个发酵过程,每2小时取样仔细进行镜检,确定染菌时间,对情况分析会有较大帮助。

你的这种情况,很是常见。因为在发酵初期,染菌不是优势菌,生长滞后缓慢,也就是生长初期;达到一定程度后进入对数生长期,染菌情况迅速能看到。
4楼2014-07-13 23:55:11
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xuyunjian

铁虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
nakamori0319: 金币+5 2014-07-14 10:51:40
会不会是您的培养基灭菌不彻底,可能是该原因。从您的描述来看,条件是一样的,唯一不同是接种,但若是染菌时间是一样,那就可能是您的大型发酵罐体的灭菌设施存在问题,致使未按要求达到灭菌效果
相信自己,永不言弃
2楼2014-07-13 22:31:45
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nakamori0319

金虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by xuyunjian at 2014-07-13 22:31:45
会不会是您的培养基灭菌不彻底,可能是该原因。从您的描述来看,条件是一样的,唯一不同是接种,但若是染菌时间是一样,那就可能是您的大型发酵罐体的灭菌设施存在问题,致使未按要求达到灭菌效果

培养基中含有2.5g/L的磷酸氢二钾和2.5的磷酸二氢钾,1的氯化镁和1的氯化钙,灭菌前是澄清的,但是灭菌后就有很多沉淀了,有沉淀会不会造成灭菌不彻底呢?如果灭菌不彻底的话,会在60h才染菌么?非常感谢您的帮助啊
3楼2014-07-13 23:04:05
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xuyunjian

铁虫 (小有名气)

引用回帖:
3楼: Originally posted by nakamori0319 at 2014-07-13 23:04:05
培养基中含有2.5g/L的磷酸氢二钾和2.5的磷酸二氢钾,1的氯化镁和1的氯化钙,灭菌前是澄清的,但是灭菌后就有很多沉淀了,有沉淀会不会造成灭菌不彻底呢?如果灭菌不彻底的话,会在60h才染菌么?非常感谢您的帮助啊...

因为在发酵初期,染菌不是优势菌,生长滞后缓慢,也就是生长初期;达到一定程度后进入对数生长期,染菌情况迅速能看到。
相信自己,永不言弃
5楼2014-07-14 07:59:22
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