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张冰宝

新虫 (小有名气)

[求助] 胶回收后目的条带偏高，怎么回事。 已有4人参与

我做目的条带的胶回收，但是回收两次了，每次都比我要的条带高，大概高500bp这是怎么回事啊 ？
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1楼 2014-07-10 14:23:52
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鬼羽帝魂

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
kx444555: 金币+2, 鼓励交流 2014-07-10 16:50:15
分析下酶切位点，分析下你的序列，看是不是漏掉了什么东西。
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2楼2014-07-10 14:41:40
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张冰宝

新虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 鬼羽帝魂 at 2014-07-10 14:41:40
分析下酶切位点，分析下你的序列，看是不是漏掉了什么东西。

怎么分析啊？我的条带是比较高。
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3楼2014-07-10 19:43:45
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loveskyzhou

铁虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
引用回帖:
3楼: Originally posted by 张冰宝 at 2014-07-10 19:43:45
怎么分析啊？我的条带是比较高。...

就是找找是不是切下来的片段就是这么大的？会不会从别的位置切下来了？最好上图啊，目的条带应该多大？？
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我会绕一个圈，走回到实验室
4楼2014-07-11 09:07:59
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张冰宝

新虫 (小有名气)
引用回帖:
4楼: Originally posted by loveskyzhou at 2014-07-11 09:07:59
就是找找是不是切下来的片段就是这么大的？会不会从别的位置切下来了？最好上图啊，目的条带应该多大？？...

我的目的条带是1500.跑完位置正好在2000bp处。我做的双酶切，切完就两条带，我回收的是下面的目的条带，应该不会错啊
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5楼2014-07-11 09:41:59
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biology-girl

新虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
gyesang: 金币+2, 鼓励回帖交流！ 2014-07-12 15:53:40
只要是单一条带那就没事，有很多都是由于你的buffer会使你带飘逸的。
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6楼2014-07-11 15:20:37
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鬼羽帝魂

木虫 (著名写手)
引用回帖:
3楼: Originally posted by 张冰宝 at 2014-07-10 19:43:45
怎么分析啊？我的条带是比较高。...

就是在你的序列里找找你的两个酶切位点，看一下之间的序列多大。
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7楼2014-07-11 21:45:37
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张冰宝

新虫 (小有名气)
引用回帖:
7楼: Originally posted by 鬼羽帝魂 at 2014-07-11 21:45:37
就是在你的序列里找找你的两个酶切位点，看一下之间的序列多大。...

恩  我的序列里没有我的酶切位点。
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8楼2014-07-12 10:45:12
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shuhaoran88

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
张冰宝(西门吹雪170代发): 金币+1, 鼓励回帖交流 2014-07-14 18:21:24
gyesang: 金币+2, 鼓励回帖交流！ 2014-07-26 19:35:28
看你MARKER点错没？
------------------搞笑一下-------------------
话说两次带大小不一样经常会有。
原因也很多。
方法就是。切完的和回收的一起跑看是不是一样大。一样就没问题。
不一样的话可能是你没切好等等各种原因。
不放心就去测序也就两天时间。
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9楼2014-07-14 13:11:01
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石大兽医

新虫 (初入文坛)
是不是被污染了！
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10楼2014-07-14 14:52:49
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