| 查看: 938 | 回复: 3 | ||
IMichaelhan木虫 (小有名气)
|
[求助]
求大侠帮忙关于引物设计的 已有1人参与
|
|
下面两个引物是我设计的，我要扩的是5K左右的产物，这种长的产物不好扩增，已经跑了6对引物了，结果不是一片模糊就是特异性不强。对于我一个初学者来说这是最艰难的了，好歹也让我做出来一个再给我出难题吧。图1是我设计的，按照说明一步一步来的，结果hairpin, dimer, false primer, cross dimer这四种情况在结果中都有，图1就是我挑出来的最后的情况了，但是dimer的△G=-4.9，好像△G的绝对值不能超过4.5的，我也不知道那个影响有多大。图2是我把引物长度改变后，又选择的是automatic，然后出来最理想情况，但是师姐们说的一般都选择的是manual，我也不知道automatic和manual的影响有多大，还有引物长度是都选择22加减2的范围吗？ 希望大侠能回答的以下一些困扰我已久的问题： 1、hairpin, dimer, false primer, cross dimer如果不可避免怎么办？△G值不能超过多少？ 2、设计引物时是选择automatic还是manual，选择不同有什么影响？ 3、扩5K、10K产物引物长度设在多少合适？ 4、我还能不能做出来？  360截图20140706203938062.jpg  2.jpg |
回复此楼» 猜你喜欢
留学--博士招生
已经有16人回复
-
化学工程，本211，求调剂，ab区不限
已经有4人回复
-
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有190人回复
-
湖北师范大学招调剂啦
已经有8人回复
-
邵阳学院食品与化学工程学院硕士调剂
已经有0人回复
-
天津商业大学 生物与医药课题组招生
已经有0人回复
-
生物化工学硕招收调剂
已经有0人回复
-
广东石油化工学院2026年硕士研究生需要多名生物，制药工程，食品专业的调剂生
已经有0人回复
-
317分 一志愿江南大学 化学工程学硕 求调剂
已经有6人回复
-
化工申博
已经有3人回复
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- 请帮忙设计荧光定量PCR引物
已经有7人回复
- Takara基因步移试剂盒-AP引物
已经有21人回复
- 各位学长、学姐帮帮忙，PCR只有引物二聚体
已经有18人回复
- 各位大神帮帮忙设计一对引物。
已经有20人回复
- 要做race，求大侠帮忙设计引物，用的是TAKARA的试剂盒
已经有4人回复
- primer6.0 引物设计
已经有5人回复
- SOS，求助，NCBI上引物比对问题
已经有6人回复
- 克隆表达 引物设计
已经有31人回复
- 关于PCR引物中加入酶切位点的设计方法和酶切问题！ 新手，求帮忙！！
已经有4人回复
- 关于实时荧光定量引物设计
已经有5人回复
- 请大家帮忙看看引物二聚体的问题
已经有5人回复
- RT-PCR结果分析求助
已经有5人回复
- 求大虫帮忙看看通用引物PCR跑胶结果
已经有11人回复
- 帮忙评价一下PCR引物
已经有11人回复
- 求帮忙分析下菌液PCR检测结果
已经有19人回复
- 敢问众位大侠每个生物的GAPDH序列都是一样的吗？
已经有8人回复
- 【求助/交流】设计的引物在NCBI blast中比对居然没有我的目的片段
已经有5人回复
- 【求助/交流】primer-blast
已经有3人回复
- 【求助/交流】NCBI中对设计的引物blast时E值怎么看？
已经有5人回复
- Primer BLAST：NCBI 的引物设计和特异性检验工具
已经有244人回复
- 【求助】p4vasp出现的问题 哪位大侠帮忙解决
已经有5人回复
匿名
木虫 (小有名气)
小志
- 应助: 3 (幼儿园)
- 金币: 1714.8
- 红花: 1
- 帖子: 146
- 在线: 287.5小时
- 虫号: 0
- 注册: 2013-05-01
- 性别: GG
- 专业: 生化分析及生物传感
2楼2014-07-06 21:57:04
IMichaelhan
木虫 (小有名气)
- 应助: 0 (幼儿园)
- 金币: 3554.6
- 帖子: 54
- 在线: 15.9小时
- 虫号: 2339703
- 注册: 2013-03-12
- 专业: 生物物理、生物化学与分子
3楼2014-07-06 22:10:16
匿名
木虫 (小有名气)
小志
- 应助: 3 (幼儿园)
- 金币: 1714.8
- 红花: 1
- 帖子: 146
- 在线: 287.5小时
- 虫号: 0
- 注册: 2013-05-01
- 性别: GG
- 专业: 生化分析及生物传感
4楼2014-07-06 22:52:02
