应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 生物化学 » 纤维蛋白原跑SDS-PAGE凝胶，急！
101/1返回列表
查看: 1776  |  回复: 9
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

dong10zhou

铁虫 (初入文坛)

[求助] 纤维蛋白原跑SDS-PAGE凝胶，急！ 已有4人参与

我想用SDS-PAGE凝胶跑纤维蛋白原，不知道跑出来应该是什么样的？我用12%的胶，电压200V，跑出来是两条带？怎么回事？还有条带的颜色很浅，该怎么优化？各种问题急需解决，还请高人指点。。。。

纤维蛋白原跑SDS-PAGE凝胶，急！
Administrator 2014-06-27 09 时 18 分 拷贝.jpg
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2014-06-28 10:14:20
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

长相思

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
gyesang: 金币+2, 鼓励回帖交流！ 2014-06-28 22:57:24
dong10zhou: 金币+1, ★有帮助 2014-07-01 17:02:22
两条带很正常啊，蛋白的size不同啊，就看是不是你想看到的KD值罗。还有电压有点高吧，一般我用的是top胶90V,分离胶110V。
赞一下(1人) 回复此楼
未来很美好
2楼2014-06-28 10:32:36
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

dong10zhou

铁虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 长相思 at 2014-06-28 10:32:36
两条带很正常啊，蛋白的size不同啊，就看是不是你想看到的KD值罗。还有电压有点高吧，一般我用的是top胶90V,分离胶110V。

那两条带颜色浅是怎么回事呀?是染色时间不够吗，我染了一个多小时，脱色时间过夜了。。。。
赞一下 回复此楼
3楼2014-06-28 11:24:39
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

西门吹雪170

荣誉版主 (职业作家)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
gyesang: 金币+3, 鼓励回帖交流！ 2014-06-28 22:57:34
dong10zhou: 金币+2, ★★★很有帮助 2014-07-01 17:02:48
1、你的条带还没有跑得很开，为什么不再多跑点时间？
2、根据你的marker可以看出染色与脱色的影响应该不大
3、我们一般浓缩胶80V，分离胶100-120V，如果要跑好点的图，可以用小点的电压
4、样品条带有点弱，可以试试增加上样量
5、如果觉得染色脱色的问题很大，你可以重新配制染色液，一般染个5-10min就可以了，脱色要控制好时间，脱太久条带也会变弱
赞一下(1人) 回复此楼
植根于内心的修养；无需提醒的自觉；以约束为前提的自由；为别人着想的善良
4楼2014-06-28 12:52:50
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

dong10zhou

铁虫 (初入文坛)
引用回帖:
4楼: Originally posted by 西门吹雪170 at 2014-06-28 12:52:50
1、你的条带还没有跑得很开，为什么不再多跑点时间？
2、根据你的marker可以看出染色与脱色的影响应该不大
3、我们一般浓缩胶80V，分离胶100-120V，如果要跑好点的图，可以用小点的电压
4、样品条带有点弱，可以 ...

原来这样啊，我跑过80、120V的电压，跑的时间很长，才用了200V的电压，跑的时间长了是不是也有影响呢？下次试试小点的电压。。。谢谢你的回答
赞一下 回复此楼
5楼2014-06-28 14:10:57
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

biology-girl

新虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
gyesang: 金币+2, 鼓励回帖交流！ 2014-06-28 22:57:43
dong10zhou: 金币+1, ★★★很有帮助 2014-07-01 17:04:00
用超滤管浓缩一下，或者加大上样量，煮沸时间久一点，就相当于浓缩了。
赞一下(1人) 回复此楼
6楼2014-06-28 14:26:19
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

西门吹雪170

荣誉版主 (职业作家)
引用回帖:
5楼: Originally posted by dong10zhou at 2014-06-28 14:10:57
原来这样啊，我跑过80、120V的电压，跑的时间很长，才用了200V的电压，跑的时间长了是不是也有影响呢？下次试试小点的电压。。。谢谢你的回答...

跑得时间长的确是不太好，但是我不确定你用200V的电压是否合适，我们用大胶跑也没有用过这么大的电压啊
赞一下 回复此楼
植根于内心的修养；无需提醒的自觉；以约束为前提的自由；为别人着想的善良
7楼2014-06-28 17:31:52
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

长相思

银虫 (小有名气)
引用回帖:
3楼: Originally posted by dong10zhou at 2014-06-28 11:24:39
那两条带颜色浅是怎么回事呀?是染色时间不够吗，我染了一个多小时，脱色时间过夜了。。。。...

不是时间不够吧，你的marker可以了，染的很好啊，是你的蛋白含量不多吧。再你可以在分离胶里面不要加10%SDS再做下。要是只有一条带就可以
赞一下 回复此楼
未来很美好
8楼2014-06-28 21:21:43
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

55liuyan

银虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
针对分不开的问题，你可以考虑增加胶的浓度，同时减小电压，速度慢一点会分开的更好一些
赞一下 回复此楼
每日三省吾身，平静，定气
9楼2014-06-30 12:22:49
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

dong10zhou

铁虫 (初入文坛)
引用回帖:
9楼: Originally posted by 55liuyan at 2014-06-30 12:22:49
针对分不开的问题，你可以考虑增加胶的浓度，同时减小电压，速度慢一点会分开的更好一些

不是应该降低胶的浓度吗？分离大分子的不是应该用低浓度的胶吗》？
赞一下 回复此楼
10楼2014-07-01 17:06:28
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 dong10zhou 的主题更新
101/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考博] 售SCI一区文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可伽急 +3 0XLacIJUOj8D 2026-08-24 3/150 2026-08-25 01:47 by BZKMTicpDhFj
[基金申请] 明天应该可查了！？ +5 chengyan1220 2026-08-23 5/250 2026-08-24 23:28 by 我4大白菜
[基金申请] 如果此刻你正在为国基感到焦虑，不妨来听听这首《基金之外》 +7 scalable 2026-08-24 7/350 2026-08-24 23:01 by anata1209
[基金申请] 没有任何消息-是不是就凉了 +7 图啦图啦 2026-08-24 8/400 2026-08-24 22:00 by maomao_da
[论文投稿] 售SCI-T0P文章，我:8O.5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 0XLacIJUOj8D 2026-08-24 3/150 2026-08-24 21:59 by BZKMTicpDhFj
[基金申请] 我面上完蛋了 +9 且听虎啸 2026-08-20 10/500 2026-08-24 20:08 by 苦寒来香
[基金申请] filecode，4个jtjc了 +14 ziyangfang 2026-08-19 17/850 2026-08-24 18:37 by 哈哈蛤？
[基金申请] 2026国自然函评费到账 +17 羊腰板 2026-08-21 19/950 2026-08-24 16:52 by iaeyuan
[基金申请] 建议基金发布提前给出明确的时间点 +13 kulium 2026-08-21 16/800 2026-08-24 16:27 by superceng
[基金申请] 今日不放榜？网传国自然预计 8 月 27 日可查结果 +17 医学老男孩 2026-08-20 21/1050 2026-08-24 14:21 by refreshing11
[基金申请] 估计是周四 +4 archvillain 2026-08-18 4/200 2026-08-24 13:53 by zzuzxg
[基金申请] 范进中举一文的中心思想 +6 炎黄贵胄 2026-08-22 7/350 2026-08-24 11:58 by 6543yes
[基金申请] 朋友圈看到的 +7 wangzilk 2026-08-18 9/450 2026-08-24 10:50 by cmrandy
[基金申请] 科研孤儿太难了 +18 我4大白菜 2026-08-20 19/950 2026-08-24 09:47 by 凯恩广盛催化分�
[基金申请] 什么时候开奖？ +10 CrisMessi 2026-08-18 11/550 2026-08-24 06:50 by 开心的小狮子
[基金申请] 2026年的国家社科基金项目通讯评审的新规则与新动向、新挑战 +4 process2012 2026-08-23 5/250 2026-08-23 19:58 by jurkat.1640
[基金申请] 时间戳今天，20号变了 +5 archvillain 2026-08-20 5/250 2026-08-22 06:12 by hui_daxiao
[基金申请] 时间戳又变了 +13 wuchongjun 2026-08-20 19/950 2026-08-21 17:21 by 紫杉醇
[基金申请] 今天放榜没戏了吧 +9 yuleib84 2026-08-19 11/550 2026-08-21 10:06 by gltch
[基金申请] 基金啊基金 +4 longfie172 2026-08-20 4/200 2026-08-21 08:58 by mark mao
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭