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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 层析/纯化 » 蛋白质纯化后浓缩发现沉淀了？请问大神如何解决？
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Anson1358

铁杆木虫 (著名写手)

[求助] 蛋白质纯化后浓缩发现沉淀了？请问大神如何解决？ 已有4人参与

我纯化的蛋白质复合物浓缩时发现很多蛋白沉淀了，请问各位是什么原因造成蛋白沉淀的？pH我试了7.5和8.0的没有区别，NaCl浓度为150mM。我想调整一下盐浓度，请问大约多大浓度合适？
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一个人可以不成功，但不可以不成长！
1楼 2014-06-26 13:39:26
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zhenwuhuang

至尊木虫 (文学泰斗)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
蛋白质纯化中硫酸铵沉淀后沉淀溶解的问题
http://muchong.com/html/201307/6133128.html
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2楼2014-06-26 14:06:35
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Anson1358

铁杆木虫 (著名写手)
引用回帖:
2楼: Originally posted by zhenwuhuang at 2014-06-26 14:06:35
蛋白质纯化中硫酸铵沉淀后沉淀溶解的问题
http://muchong.com/html/201307/6133128.html

我的问题是怎么组织蛋白沉淀，不是沉淀后怎么溶解！！！！！
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一个人可以不成功，但不可以不成长！
3楼2014-06-26 18:24:59
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younghe

铁虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
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Anson1358: 金币+7, ★★★很有帮助, 谢谢 2014-06-29 09:14:32
可以提高盐浓度，0.5M NaCl试试，还可以加点甘油5-10%
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4楼2014-06-26 21:45:04
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pennchem

专家顾问 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
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Anson1358: 金币+3, ★★★很有帮助, 谢谢 2014-06-29 09:14:52
楼上正解，另外，考虑一下缓冲液的pH值离蛋白pI1.5个单位或更远比较保险。
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行至水穷处，坐看云起时
5楼2014-06-26 22:44:38
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环境增值联盟

铁虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
2014化学生物学与一氧化氮（NO）国际会议      大会官网：http://broadway.sjtu.edu.cn，2014年7月4-6日，上海。议题：化学生物学、NO、组学（NO仅为议题中的三分之一）。诺贝尔医学奖获得者Ferid Murad教授担任大会名誉主席，科技部原副部长程津培院士担任大会主席。
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6楼2014-06-27 11:18:15
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