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Kitty564

禁虫 (小有名气)

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luca5s

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖


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辣笔v小新: 金币+1, 鼓励应助交流 2014-06-28 02:16:47
背景高可能是是封闭的时间不够,或者二抗浓度高了,你可以加大点一抗的浓度。-20应该不会降解吧,你可以再做试试,WB是个考验人品的过程,但是要有一定能做出的信念
咳咳
2楼2014-06-27 07:20:08
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jnu2012

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
xiaoxiao270: 金币+1, 3Q 2014-08-02 20:02:23
封闭时间不够,最好是过夜,最少也3个小时
3楼2014-06-28 00:08:04
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Kitty564

禁虫 (小有名气)


wangkaibo123: 金币+1, 鼓励积极交流经验 3q 2014-08-10 15:14:41
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4楼2014-06-30 09:21:42
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Kitty564

禁虫 (小有名气)

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5楼2014-06-30 09:22:54
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luca5s

金虫 (小有名气)


wangkaibo123: 金币+1, 鼓励积极交流经验 3q 2014-08-10 15:15:05
引用回帖:
5楼: Originally posted by Kitty564 at 2014-06-30 09:22:54
室温封闭4个小时够吗?你们通常二抗什么比例稀释?...

每个实验室情况不同,我一般37度摇床封闭2h,二抗的话1:7500或8000,但是要是自己感觉高的话可以降啊,膜的话,背景高,可以爆完之后再用pbst或tbst再洗洗,然后再爆,把膜用到极致吧,加油!
咳咳
6楼2014-06-30 10:08:03
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zhengyuanhui

禁虫 (小有名气)


wangkaibo123: 金币+1, 鼓励积极交流经验 3q 2014-08-10 15:15:14
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7楼2014-07-23 16:17:51
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Kitty564

禁虫 (小有名气)


wangkaibo123: 金币+1, 鼓励积极交流经验 3q 2014-08-10 15:15:24
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8楼2014-08-02 10:36:02
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Kitty564

禁虫 (小有名气)


wangkaibo123: 金币+1, 鼓励积极交流经验 3q 2014-08-10 15:15:34
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9楼2014-08-02 10:43:19
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luca5s

金虫 (小有名气)


wangkaibo123: 金币+1, 鼓励积极交流经验 3q 2014-08-10 15:15:42
引用回帖:
9楼: Originally posted by Kitty564 at 2014-08-02 10:43:19
再问一个问题,我的目的蛋白是120KD左右,转膜时marker已转至膜上,内参处marker也转到膜上,一抗4度过夜,二抗4度一个小时,显影时内参正常,本人第一次做时显影结果较好,但后来重复时目的蛋白有时候完全没有,有 ...

很正常,孵育啊加显色液啊不均匀都有可能吧,多注意细节。都是这样的。
咳咳
10楼2014-08-10 14:28:27
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