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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 药学 » 药物分析 » 求助：高效液相色谱以甲醇为溶剂，乙腈为流动相，梯度洗脱为什么在37min左右会出峰？
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lilianlcx

金虫 (正式写手)

[求助] 求助：高效液相色谱以甲醇为溶剂，乙腈为流动相，梯度洗脱为什么在37min左右会出峰？已有3人参与

大哥哥，大姐姐，我第一次做高效，很多不懂，请大家多多指教。本人以甲醇为溶剂，乙腈和磷酸盐水溶液为流动相全波长梯度洗脱，在37分钟左右总是出现一个很明显的峰，并且可以直接观察到，当以340nm查看时，就不出现，跪求大家帮忙分析分析。万分感激啊！
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愿家人平平安安，工作顺利，一切都安好!
1楼2014-06-19 15:47:40
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lilianlcx

金虫 (正式写手)
引用回帖:
2楼: Originally posted by zky_panmeng at 2014-06-19 17:27:21
你流动相的比例是什么？有可能是35分钟左右比例突然变化造成。还有你可以走一针溶剂空白对照，比如样品是甲醇溶解的，那么只走一针甲醇（不加样品），如果37分还有峰，那就是整个系统的干扰，包括流动相不干净，泵， ...

谢谢你，我确实今天走了几针空白甲醇，因我的甲醇用的是分析纯的，开始怀疑是不是被污染了，就走了1针原取样瓶的分析纯甲醇，还是在37min有峰，就换了瓶新的分析纯甲醇，同样有峰，而后换了一针色谱纯的甲醇同样如此。现在我真不知道实验该怎么继续了。
我的流动相为：A乙腈：B0.02磷酸水溶液。
梯度是：
0~8min   15%A ：85%B
8~10min  25%A ：75%B
10~25min 30%A ：70%B
25~30min 35%A ：65%B
30~45min 73%A ：27%B
45min~     90%A ：10%B
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愿家人平平安安，工作顺利，一切都安好!
3楼2014-06-19 17:50:21
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