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lilianlcx

金虫 (正式写手)

[求助] 求助:高效液相色谱以甲醇为溶剂,乙腈为流动相,梯度洗脱为什么在37min左右会出峰? 已有3人参与

大哥哥,大姐姐,我第一次做高效,很多不懂,请大家多多指教。本人以甲醇为溶剂,乙腈和磷酸盐水溶液为流动相全波长梯度洗脱,在37分钟左右总是出现一个很明显的峰,并且可以直接观察到,当以340nm查看时,就不出现,跪求大家帮忙分析分析。万分感激啊!
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愿家人平平安安,工作顺利,一切都安好!
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lilianlcx

金虫 (正式写手)

引用回帖:
2楼: Originally posted by zky_panmeng at 2014-06-19 17:27:21
你流动相的比例是什么?有可能是35分钟左右比例突然变化造成。还有你可以走一针溶剂空白对照,比如样品是甲醇溶解的,那么只走一针甲醇(不加样品),如果37分还有峰,那就是整个系统的干扰,包括流动相不干净,泵, ...

谢谢你,我确实今天走了几针空白甲醇,因我的甲醇用的是分析纯的,开始怀疑是不是被污染了,就走了1针原取样瓶的分析纯甲醇,还是在37min有峰,就换了瓶新的分析纯甲醇,同样有峰,而后换了一针色谱纯的甲醇同样如此。现在我真不知道实验该怎么继续了。
我的流动相为:A乙腈:B0.02磷酸水溶液。
梯度是:
0~8min   15%A :85%B
8~10min  25%A :75%B
10~25min 30%A :70%B
25~30min 35%A :65%B
30~45min 73%A :27%B
45min~     90%A :10%B
愿家人平平安安,工作顺利,一切都安好!
3楼2014-06-19 17:50:21
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zky_panmeng

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
辣笔v小新: 金币+1, 鼓励应助交流 2014-06-19 21:20:00
lilianlcx: 金币+5, 应该就是所谓的鬼峰吧?因不影响我其他成分,就暂时忽略了 2014-06-23 12:23:35
你流动相的比例是什么?有可能是35分钟左右比例突然变化造成。还有你可以走一针溶剂空白对照,比如样品是甲醇溶解的,那么只走一针甲醇(不加样品),如果37分还有峰,那就是整个系统的干扰,包括流动相不干净,泵,色谱柱等等
2楼2014-06-19 17:27:21
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changjun

铜虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
lilianlcx: 金币+2, 直接进的空白甲醇都有这个峰~而且在340nm不显示,在205~285都会有 2014-06-23 12:24:34
样品的溶解性怎么样?有可能是样品在流动相中溶解性不好,在柱子上是逐渐溶解在流动相中的,所以在固定的时间一直有峰。
天然产物、药物开发
4楼2014-06-19 18:04:59
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sunxingyuan

银虫 (正式写手)

1.把那个峰当作溶剂峰扣除不就完了。
2.340检测时没有了很正常,溶剂峰的产生与波长是有关系的。
5楼2015-03-01 10:15:31
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