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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 药学 » 天然药物化学 » 高效液相色谱图分析
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bayu18

新虫 (正式写手)

[求助] 高效液相色谱图分析

我用色谱级的阿魏酸做了HPLC，流动相是乙腈：0.3%冰醋酸水溶液（2:8），结果得到如下液相图（见附件）。标准品出峰应该在18分钟左右，但是前面出现的很多峰是什么原因啊？
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    • 2013-05-28 16:16:41, 60 K

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1楼 2013-05-28 16:20:09
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回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

weijie2013

金虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★
bayu18: 金币+2, ★有帮助 2013-05-30 09:37:07
你的流动相是乙腈：0.3%冰醋酸水溶液（2:8），而样品溶剂是95%的甲醇，两则之间肯定存在不同溶i剂之间的互溶分配的过程，而溶剂差异越大这个过程越长，会在色谱的早期产生峰和一定的滞留，特别是梯度洗脱时更换溶剂更会产生，我现在在做一个梯度洗脱的，特意查了一下有关溶剂对峰及基线的影响的资料，才发现的，你也可以看看的
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7楼2013-05-29 09:33:08
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普通回帖

weijie2013

金虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
你首先确定你用的样品溶剂是不是流动相，不是的话，可能产生溶剂峰和以及滞留体积，从而造成基线的变化，和保留时间的变化。
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2楼2013-05-28 19:17:21
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gslzzhixin

铁杆木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
换个紫外检测波长试试。

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
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3楼2013-05-28 23:42:32
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bayu18

新虫 (正式写手)
引用回帖:
2楼: Originally posted by weijie2013 at 2013-05-28 19:17:21
你首先确定你用的样品溶剂是不是流动相，不是的话，可能产生溶剂峰和以及滞留体积，从而造成基线的变化，和保留时间的变化。

我用的样品溶剂是95%的甲醇，如果是溶剂峰的话，前面不会出那么多峰啊，滞留体积是怎么回事？
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4楼2013-05-29 08:33:44
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bayu18

新虫 (正式写手)
引用回帖:
3楼: Originally posted by gslzzhixin at 2013-05-28 23:42:32
换个紫外检测波长试试。

我检测了好几个波长，都是这样啊
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5楼2013-05-29 08:34:58
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kjxj314

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
bayu18: 金币+1, ★有帮助 2013-05-30 09:36:53
你换根柱子试试，也有可能是柱子的原因，多冲冲看。我也碰到过。
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6楼2013-05-29 09:23:14
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bayu18

新虫 (正式写手)
引用回帖:
6楼: Originally posted by kjxj314 at 2013-05-29 09:23:14
你换根柱子试试，也有可能是柱子的原因，多冲冲看。我也碰到过。

你换了柱子之后就解决了么？换的什么柱子啊？
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8楼2013-05-29 09:37:06
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bayu18

新虫 (正式写手)
引用回帖:
7楼: Originally posted by weijie2013 at 2013-05-29 09:33:08
你的流动相是乙腈：0.3%冰醋酸水溶液（2:8），而样品溶剂是95%的甲醇，两则之间肯定存在不同溶i剂之间的互溶分配的过程，而溶剂差异越大这个过程越长，会在色谱的早期产生峰和一定的滞留，特别是梯度洗脱时更换溶剂 ...

我这个乙腈：0.3%冰醋酸水溶液（2:8）是一个固定的比例啊，不是梯度洗脱啊，如何操作才能避免在色谱的早期产生峰和一定的滞留？把你的资料共享一下吧，谢谢！
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9楼2013-05-29 09:44:23
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whm2013528

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
bayu18: 金币+2, ★有帮助 2013-05-30 09:35:23
看到楼主的色谱图，感觉应该用的是N2000的工作站。楼主可以在进对照品之前进95%甲醇，作为空白溶剂对照，在同样的色谱条件下看看是否有前面那些小峰，如果有，那真是溶剂造成的。楼主先前要好好清洗柱子呀！也可能是其他残留。。。祝楼主顺利。
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I am the future...
10楼2013-05-29 21:57:29
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