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知之为知之a

新虫 (初入文坛)

应助: 0 (幼儿园)
金币: 6.6
帖子: 4
在线: 4.1小时
虫号: 3030633
注册: 2014-03-09
性别: GG
专业: 细胞生物学研究中的新方法

[求助] 可溶性蛋白在沉淀里面，不在上清液肿么办啊已有10人参与

做了好几次SDS-PAGE，设计的可溶性蛋白经过细胞破碎后，只发现在下层沉淀里面有表达的诱导蛋白，诱导温度30摄氏度，IPTG浓度0.5mM.时间5个小时。

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知之为知之

1楼2014-06-18 08:19:30

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duanjifu520

铜虫 (正式写手)

应助: 1 (幼儿园)
金币: 5917.9
散金: 308
红花: 2
帖子: 678
在线: 212.5小时
虫号: 1646710
注册: 2012-02-27
专业: 生物物理、生物化学与分子

【答案】应助回帖

我觉得应该是溶液环境造成了蛋白的沉淀你可以试试改变下例如ph 可以直接在细胞破碎后的混液体中加入微酸或弱碱试试。或者是其中含有某种较高浓度的蛋白沉淀剂多分析慢慢排除吧

[ 发自小木虫客户端 ]

6楼2014-06-21 13:47:55

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