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一锅鱼38

新虫 (初入文坛)

[求助] 急!用于SDS-PAGE的蛋白稀释要用什么缓冲液 已有1人参与

急!用于SDS-PAGE的蛋白稀释要用什么缓冲液,如是PBS,请问配方是什么,PH要多少?谢谢
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sunrq516516

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
你说的应该是这些吧?就是用来把蛋白配成同一浓度的buffer?
For tissues: RIPA buffer
Stock                                        Fresh
Tris                 65 mM        NaF        10 mM
NaCl                150 mM        NA3VO4        1 mM
EDTA                5 mM        PMSF        1 mM
NP-40                1%        protease/phosphatase inhibitors        10 ul/ml
Na-deoxycholate        0.50%               
SDS                0.10%               
glycerol                 10%               

For cells: HES buffer
Stock                        Fresh
HEPES        5 mM        NaF        10 mM
EDTA        0.5 mM        PMSF        1 mM
sucrose        250 mM        protease/phosphatase inhibitors        10 ul/ml

pH都调到7.4吧。
这里stock都是十倍的,用的时候稀释成1倍然后加Fresh里列出的各种抑制剂。
Permanent head Damage
2楼2014-06-04 08:28:18
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