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基因敲除问题
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mochenmi
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基因敲除问题
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使用bar基因,用同源重组方法敲除一个真菌的基因,农杆菌介导后挑取了大量菌落提取DNA逐个进行PCR检验。
使用bar基因能扩出,但是使用原基因引物扩增出来的依然是以前的长度,bar基因并没有交换进去。想知道是实验失败了?还是只是没挑到转化子而已?
另外bar基因为什么能扩出?插入到哪里去了?
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1楼
2014-06-03 20:55:40
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kx444555: 金币+2, 鼓励交流
2014-06-25 08:28:41
随机整合进去了。可以设计同源臂外端引物,配合bar基因内部引物,看看能不能扩出来。但按照你的实验结果,应该是没有晒到转化子,都是随机整合。
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6楼
2014-06-24 23:14:27
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luwei13566
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mochenmi(kx444555代发): 金币+2, 鼓励交流
2014-06-04 08:22:52
bar基因随机整合在基因组其他区域上的可能性最大。。。。
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大家相互帮助哈
2楼
2014-06-03 23:44:53
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mochenmi
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Originally posted by
luwei13566
at 2014-06-03 23:44:53
bar基因随机整合在基因组其他区域上的可能性最大。。。。
那实验操作还是没问题吧? 只是没挑到转化子而已?
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3楼
2014-06-06 10:41:33
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luwei13566
at 2014-06-03 23:44:53
bar基因随机整合在基因组其他区域上的可能性最大。。。。
另外bar基因不会连同两边的同源臂一起随机插入嘛?
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4楼
2014-06-06 10:43:51
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