24小时热门版块排行榜    

查看: 1586  |  回复: 6

mochenmi

铜虫 (小有名气)

[求助] 基因敲除问题 已有2人参与

使用bar基因,用同源重组方法敲除一个真菌的基因,农杆菌介导后挑取了大量菌落提取DNA逐个进行PCR检验。
使用bar基因能扩出,但是使用原基因引物扩增出来的依然是以前的长度,bar基因并没有交换进去。想知道是实验失败了?还是只是没挑到转化子而已?
另外bar基因为什么能扩出?插入到哪里去了?
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

luwei13566

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
mochenmi(kx444555代发): 金币+2, 鼓励交流 2014-06-04 08:22:52
bar基因随机整合在基因组其他区域上的可能性最大。。。。
大家相互帮助哈
2楼2014-06-03 23:44:53
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

mochenmi

铜虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by luwei13566 at 2014-06-03 23:44:53
bar基因随机整合在基因组其他区域上的可能性最大。。。。

那实验操作还是没问题吧?  只是没挑到转化子而已?
3楼2014-06-06 10:41:33
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

mochenmi

铜虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by luwei13566 at 2014-06-03 23:44:53
bar基因随机整合在基因组其他区域上的可能性最大。。。。

另外bar基因不会连同两边的同源臂一起随机插入嘛?
4楼2014-06-06 10:43:51
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

luwei13566

木虫 (正式写手)

引用回帖:
4楼: Originally posted by mochenmi at 2014-06-06 10:43:51
另外bar基因不会连同两边的同源臂一起随机插入嘛?...

都是有概率的,基因完全可能从中间交换
大家相互帮助哈
5楼2014-06-06 22:52:38
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

bioseeker

木虫 (小有名气)

★ ★
kx444555: 金币+2, 鼓励交流 2014-06-25 08:28:41
随机整合进去了。可以设计同源臂外端引物,配合bar基因内部引物,看看能不能扩出来。但按照你的实验结果,应该是没有晒到转化子,都是随机整合。
6楼2014-06-24 23:14:27
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

xinonghuyang

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

发生了随机插入,没有进行同源重组。
7楼2014-07-17 09:55:11
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 mochenmi 的主题更新
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 276求调剂 +3 YNRYG 2026-03-21 4/200 2026-03-23 08:31 by 醉在风里
[考研] 352求调剂 +3 大米饭! 2026-03-22 3/150 2026-03-22 23:28 by king123!
[考研] 生物学一志愿985,分数349求调剂 +4 zxts12 2026-03-21 7/350 2026-03-22 09:57 by zxts12
[考研] 广西大学材料导师推荐 +3 夏夏夏小正 2026-03-17 5/250 2026-03-21 22:20 by 金昊ML
[考研] 材料工程专硕 348分求调剂 +3 冬辞. 2026-03-17 5/250 2026-03-21 18:47 by 学员8dgXkO
[考研] 求助 +5 梦里的无言 2026-03-21 6/300 2026-03-21 17:51 by 学员8dgXkO
[考研] 材料与化工(0856)304求 B区 调剂 +3 邱gl 2026-03-21 3/150 2026-03-21 13:47 by lature00
[考研] 330求调剂0854 +3 assdll 2026-03-21 3/150 2026-03-21 13:01 by 搏击518
[考研] 299求调剂 +6 △小透明* 2026-03-17 6/300 2026-03-21 02:42 by JourneyLucky
[考研] 083200学硕321分一志愿暨南大学求调剂 +3 innocenceF 2026-03-17 3/150 2026-03-21 02:35 by JourneyLucky
[考研] 332求调剂 +4 ydfyh 2026-03-17 4/200 2026-03-21 02:20 by JourneyLucky
[考研] 085700资源与环境308求调剂 +12 墨墨漠 2026-03-18 13/650 2026-03-21 01:42 by JourneyLucky
[考研] 271材料工程求调剂 +8 .6lL 2026-03-18 8/400 2026-03-21 00:58 by JourneyLucky
[考研] 一志愿重庆大学085700资源与环境专硕,总分308求调剂 +3 墨墨漠 2026-03-18 3/150 2026-03-21 00:39 by JourneyLucky
[考研] 一志愿南昌大学,327分,材料与化工085600 +9 Ncdx123456 2026-03-19 9/450 2026-03-20 23:41 by lovewei0727
[考研] 一志愿 西北大学 ,070300化学学硕,总分287,双非一本,求调剂。 +4 晨昏线与星海 2026-03-19 4/200 2026-03-20 22:15 by JourneyLucky
[考研] 中南大学化学学硕337求调剂 +3 niko- 2026-03-19 6/300 2026-03-20 21:58 by luoyongfeng
[考研] 261求B区调剂,科研经历丰富 +3 牛奶很忙 2026-03-20 4/200 2026-03-20 19:34 by JourneyLucky
[考研] 298-一志愿中国农业大学-求调剂 +9 手机用户 2026-03-17 9/450 2026-03-20 14:24 by 无懈可击111
[考研] 招收调剂硕士 +4 lidianxing 2026-03-19 12/600 2026-03-20 12:25 by lidianxing
信息提示
请填处理意见