应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » DNA重组 » 酵母基因敲除，同源臂长度的问题
101/1返回列表
查看: 5936  |  回复: 9
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

三蛰

铜虫 (小有名气)

[求助] 酵母基因敲除，同源臂长度的问题 已有6人参与

我做基因敲除，不太成功，现在考虑是不是我的disruption cassette 的两段的同源臂太短？38bp。必须要大于45bp？我看不少文献都是45bp。。。

[ Last edited by silicare on 2014-2-17 at 11:57 ]
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
我不会！
1楼 2014-01-08 11:28:56
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

15879003030

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
gyesang: 金币+1, 鼓励交流！ 2014-01-08 19:09:41
三蛰: 金币+2, ★有帮助 2014-01-12 21:45:31
我们通常用两三百
赞一下 回复此楼
2楼2014-01-08 12:36:59
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

三蛰

铜虫 (小有名气)
内容已删除
回复此楼
我不会！
3楼2014-01-08 22:37:48
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

spirit87

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
gyesang: 金币+2, 鼓励回帖交流经验！ 2014-01-10 23:22:56
三蛰: 金币+2, ★★★很有帮助 2014-01-12 21:45:21
酵母一般情况200以上，我们用500左右一直没有问题，某些种200bp效率会低很多
赞一下 回复此楼
4楼2014-01-10 20:01:28
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

三蛰

铜虫 (小有名气)
引用回帖:
4楼: Originally posted by spirit87 at 2014-01-10 20:01:28
酵母一般情况200以上，我们用500左右一直没有问题，某些种200bp效率会低很多

谢谢，我也想长度长点，只是看了不少文献，都是45bp，看来我得增长一点。还有，您能发给我您敲除所依据的文献吗？论文时好引用，谢谢！追加金币嘿嘿
赞一下 回复此楼
我不会！
5楼2014-01-12 21:45:08
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

beer胖

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

一般都500多bp的同源臂，好重组
赞一下 回复此楼
6楼2014-02-17 10:03:09
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

雪人25

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
kx444555: 金币+2, 鼓励交流 2014-02-18 11:50:47
貌似你用的确实太短了，酵母基因敲除一般用300-400 bp的比较合适吧
赞一下 回复此楼
7楼2014-02-17 15:38:26
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

forrestgump

新虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

500-800bp是最佳的片段，希望你考虑一下，没有见这么短的。
赞一下 回复此楼
8楼2014-02-18 14:32:37
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

小猪和哼哼

银虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★
三蛰: 金币+6, ★有帮助, 2 2014-09-04 11:13:14
个人半年多的经验，肯定同源臂长点好，但是也别太长，500bp左右我感觉效率可以，好运。
赞一下 回复此楼
9楼2014-09-03 20:16:47
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

chrqrq09

铁虫 (初入文坛)
你用的是酿酒酵母S.cerevisiae吗？这个酵母一般50bp的同源臂就可以，但对于其它的酵母如Yarrowia lipolytica,同源臂1000bp，其定点同源重组的效率还非常的低啊，我做过的1000bp的同源臂，1%的正确同源重组还达不到。
赞一下 回复此楼
你好
10楼2015-05-11 22:33:59
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 三蛰 的主题更新
101/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 286求调剂 +6 lemonzzn 2026-03-16 9/450 2026-03-18 15:31 by vgtyfty
[考研] 311求调剂 +6 26研0 2026-03-15 6/300 2026-03-18 14:43 by haxia
[考研] 化工学硕306求调剂 +10 42838695 2026-03-12 10/500 2026-03-18 14:42 by haxia
[考研] 材料专硕306英一数二 +10 z1z2z3879 2026-03-16 13/650 2026-03-18 14:20 by 007_lilei
[考研] 收复试调剂生 +4 雨后秋荷 2026-03-18 4/200 2026-03-18 14:16 by elevennnne
[考研] 296求调剂 +5 大口吃饭 身体健 2026-03-13 5/250 2026-03-17 21:05 by 不惑可乐
[考研] 085601求调剂 +4 Du.11 2026-03-16 4/200 2026-03-17 17:08 by ruiyingmiao
[考研] 材料与化工专硕调剂 +5 heming3743 2026-03-16 5/250 2026-03-17 14:03 by 勇敢太监王公公
[考研] 一志愿南京大学，080500材料科学与工程，调剂 +4 Jy? 2026-03-16 4/200 2026-03-17 11:02 by gaoqiong
[考研] 一志愿，福州大学材料专硕339分求调剂 +3 木子momo青争 2026-03-15 3/150 2026-03-17 07:52 by laoshidan
[考研] 085600调剂 +5 漾漾123sun 2026-03-12 6/300 2026-03-16 15:58 by 漾漾123sun
[考研] 0703化学调剂，求各位老师收留 +8 秋有木北 2026-03-14 8/400 2026-03-16 15:21 by 哦哦123
[考研] 326求调剂 +3 mlpqaz03 2026-03-15 3/150 2026-03-16 07:33 by Iveryant
[考研] 22408总分284求调剂 +3 InAspic 2026-03-13 3/150 2026-03-15 11:10 by zhq0425
[考研] 289求调剂 +4 这么名字咋样 2026-03-14 6/300 2026-03-14 18:58 by userper
[考研] 复试调剂 +4 z1z2z3879 2026-03-14 5/250 2026-03-14 16:30 by JourneyLucky
[考研] 26调剂/材料科学与工程/总分295/求收留 +9 2026调剂侠 2026-03-12 9/450 2026-03-13 20:46 by 18595523086
[考研] 材料专硕350 求调剂 +4 王金科 2026-03-12 4/200 2026-03-13 16:02 by ruiyingmiao
[考研] 工科278分求调剂 +5 周慢热啊 2026-03-12 7/350 2026-03-13 15:49 by JourneyLucky
[考研] 085600材料与化工 309分请求调剂 +7 dtdxzxx 2026-03-12 8/400 2026-03-13 14:43 by jxchenghu
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭