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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » red/et同源重组相关问题！
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zhengwei188

木虫 (正式写手)

[求助] red/et同源重组相关问题！

red做基因敲除时，是不是同源片段里不能有终止密码子或起始密码子，如果可选择的序列长度不够的话该怎么办，谢谢
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1楼 2013-03-05 15:12:58
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2011sp

铁杆木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
zhengwei188: 金币+2, ★★★很有帮助 2013-03-06 15:13:13
是可以有的；可选择的序列长度短至50bp都可以，这点长度还不够吗？如果不够，那就测序获取。
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2楼2013-03-05 20:55:05
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zhengwei188

木虫 (正式写手)
是不是同源片段后可以不用跟起始和终止密码子，直接加酶切位点后加通用引物啊
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3楼2013-03-06 15:13:21
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2011sp

铁杆木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★
kx444555: 金币+1, 鼓励交流 2013-10-13 18:05:50
zhengwei188: 金币+1 2013-10-14 17:50:36
同源片段后可以不用跟起始和终止密码子，可以直接加酶切位点后加通用引物
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4楼2013-10-12 23:20:25
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20083630zhan

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★
kx444555: 金币+4, 鼓励交流 2013-10-13 18:05:55
zhengwei188: 金币+1 2013-10-14 17:50:32
zhengwei188: 金币+1 2013-10-14 17:50:46
1.同源片段是用来做同源重组的，只要她的序列与你要敲除基因前后两侧的序列完全一样就可以
2.再者你的同源臂的长度不一定是50bp同源臂的长度要根据的要敲除基因的大小来确定，大的基因敲除，同源臂的度应该适当延长，这样才有利于重组
3.至于起始密码子和终止密码子这些都是你的标记基因上带的
4.敲除片段上面启动子与终止子的选择要根据的是真核还是原核来确定
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5楼2013-10-13 09:09:29
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w13649513120

新虫 (初入文坛)
求助大神，请问有Red/ET同源重组这个质粒么？
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6楼2018-01-25 17:21:45
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