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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » DNA重组 » 酵母基因敲除，同源臂长度的问题
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三蛰

铜虫 (小有名气)

[求助] 酵母基因敲除，同源臂长度的问题已有6人参与

我做基因敲除，不太成功，现在考虑是不是我的disruption cassette 的两段的同源臂太短？38bp。必须要大于45bp？我看不少文献都是45bp。。。

[ Last edited by silicare on 2014-2-17 at 11:57 ]
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我不会！
1楼2014-01-08 11:28:56
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chrqrq09

铁虫 (初入文坛)
你用的是酿酒酵母S.cerevisiae吗？这个酵母一般50bp的同源臂就可以，但对于其它的酵母如Yarrowia lipolytica,同源臂1000bp，其定点同源重组的效率还非常的低啊，我做过的1000bp的同源臂，1%的正确同源重组还达不到。
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你好
10楼2015-05-11 22:33:59
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15879003030

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
gyesang: 金币+1, 鼓励交流！ 2014-01-08 19:09:41
三蛰: 金币+2, ★有帮助 2014-01-12 21:45:31
我们通常用两三百
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2楼2014-01-08 12:36:59
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spirit87

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
gyesang: 金币+2, 鼓励回帖交流经验！ 2014-01-10 23:22:56
三蛰: 金币+2, ★★★很有帮助 2014-01-12 21:45:21
酵母一般情况200以上，我们用500左右一直没有问题，某些种200bp效率会低很多
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4楼2014-01-10 20:01:28
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三蛰

铜虫 (小有名气)
引用回帖:
4楼: Originally posted by spirit87 at 2014-01-10 20:01:28
酵母一般情况200以上，我们用500左右一直没有问题，某些种200bp效率会低很多

谢谢，我也想长度长点，只是看了不少文献，都是45bp，看来我得增长一点。还有，您能发给我您敲除所依据的文献吗？论文时好引用，谢谢！追加金币嘿嘿
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我不会！
5楼2014-01-12 21:45:08
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