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linsui1989

新虫 (小有名气)

[求助] 荧光定量PCR的抑制剂是什么已有2人参与

看到一篇博客,“反应体系中的抑制剂的出现也可能导致扩增效率明显增加,原因是高浓度模板样本中抑制剂的浓度低,导致反应的Ct值延迟出现,而低浓度模板样本中抑制剂浓度高,反应的Ct值延迟程度小,导致斜率的绝对值以及计算所得的扩增效率会增加。”,其中的抑制剂是指什么?我碰到这种情况了,但不知道该怎么解决。模板是质粒
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Explor

新虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

我师兄用BIOG的PCR试剂盒,盒子里都配好了组分,不需要另外准备抑制剂的。
个性化基因研究、科研试剂、诊断试剂和实验服务
2楼2019-12-27 09:36:32
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山舞银蛇

铁杆木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

模板是质粒,那提取方法一般是碱裂解法。

抑制剂包括:
残余的大肠杆菌蛋白、多糖
提取试剂里残余的Na+、SDS、葡萄糖,
离心柱本身释放出来的烷烃,
稀释模板用的1xTE中的EDTA

这些都是抑制剂。
核酸提取与Taqman诊断
3楼2019-12-27 13:41:46
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