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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 菌液pcr鉴定毕赤酵母重组结果
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friedy

金虫 (初入文坛)

[求助] 菌液pcr鉴定毕赤酵母重组结果 已有1人参与

对毕赤酵母菌重组后保存的甘油菌进行活化，直接菌液pcr鉴定重组的是否完整。因为已经保存了好久，而且养了几次平板上始终没有乳白色菌落长出。重组后的目的目的片段在1000左右，空载体在600左右，对14株活化菌pcr结果，有3个没有的，最后一个在600左右的位置，其余位置正确，请问，我是可以用这些正确位置的菌进行后续的诱导和其他实验么

菌液pcr鉴定毕赤酵母重组结果
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1楼 2014-05-19 22:09:27
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friedy

金虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by luwei13566 at 2014-05-20 00:13:16
你的菌体不是乳白色的话具体是什么颜色？菌落形态怎么样？先做个镜检看看是不是酵母再说吧。 如果是酵母那退化的已经很严重了。
从电泳图上看，你的菌需要重新保存了，把验证正确的单菌落转接一下重新制一批甘油管 ...

养了几回是淡黄色的扁平片状。
1.请问退化严重了是怎么从图上看出来的呢？退化了有什么解决办法么，我下一步实验就是想要高密度发酵诱导表达蛋白的。
2.重新保存是把现在活化起来的菌加甘油就可以了么？复壮要怎么做呢？扩大培养么？
我是新手，麻烦多指教啦~~
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3楼2014-05-20 08:11:55
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