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朱星星

银虫 (小有名气)

[求助] 关于原核表达遇到的问题 已有3人参与

最近做原核表达,用的PET32和PET30,BL21的菌株,表达出来的目的蛋白位置有两个主带,特别接近,怀疑是在菌体内降解了,纯化完还是有两条带,可是我需要比较纯的蛋白做功能,不知道该怎么办?哪位大神之前遇到过或者懂其中的原理,哪里出错?
(PS:镍柱纯化后两条带,应该是C端出了问题体内降解了吧,最后边的带是过了一遍镍柱的蛋白)

关于原核表达遇到的问题
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see_uok

金虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

小强你可以把标签切了后看看还有几条带
5楼2014-05-18 20:45:43
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查看全部 6 个回答

Neo2000

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
laozuzunzhe: 金币+1, 鼓励应助! 2014-05-15 10:14:21
有可能存在提前终止的情况

[ 发自小木虫客户端 ]
2楼2014-05-14 10:58:00
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872940890

铁虫 (小有名气)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
laozuzunzhe: 金币+1, 鼓励应助交流! 2014-05-15 10:14:31
两条带位置相近 如果要是降解了 不是应该有一长 一短的两条吗?
我知道我得继续努力!加油!
3楼2014-05-14 11:35:37
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朱星星

银虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by Neo2000 at 2014-05-14 10:58:00
有可能存在提前终止的情况

你好,为什么有些没有提前终止,而有些提前终止了呢?请问是哪些原因呢?我不是很了解,正打算查一查,知道的话麻烦教教我哈
4楼2014-05-15 07:56:56
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