24小时热门版块排行榜    

查看: 4541  |  回复: 13

我听五月天

木虫 (正式写手)

[求助] 要做western blot的话应该用24孔板还是什么?

如题,实验设计是这样的样品1有9个浓度、样品2有一个浓度、样品2+样品1(9个)、空白组,也就是大概20个组。因为没做过所以不知道样细胞要达到多少才可以做western blot?用24孔板一孔一个组的话得到的最后细胞裂解物的量够用否?
话说24孔板一孔应该放多少细胞来铺板,是不是跟96孔板密度要求应该一样啊?每孔的培养基又该给多少?
回复此楼

» 收录本帖的淘帖专辑推荐

分子生化实验经验积累

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

为爱而生
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

BioChen

银虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
我听五月天: 金币+5, ★★★很有帮助 2014-05-07 22:44:44
12孔板,每孔大概能提取到200ug左右的总蛋白,能跑1-2次western。
4楼2014-05-07 12:20:59
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
普通回帖

gyesang

荣誉版主 (著名写手)

优秀版主优秀版主

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
我听五月天: 金币+5, ★★★很有帮助 2014-05-07 22:41:32
24孔板最后收的蛋白样品比较少,鉴于你分组比较多,你可以用12孔做,每个孔铺大约20万个细胞,细胞长至90%做处理
学术问题讨论咨询发邮件gyesang@163.com
2楼2014-05-07 00:37:33
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

sunrq516516

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
我听五月天: 金币+5, ★★★很有帮助 2014-05-07 22:42:13
12孔我觉得是极限了,一般我们会做6孔板
Permanent head Damage
3楼2014-05-07 07:47:40
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yanxing90

禁虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
我听五月天: 金币+3, ★★★很有帮助 2014-05-07 22:44:58
24孔板确实细胞少了点,除非是长得比较满的细胞。

[ 发自小木虫客户端 ]
5楼2014-05-07 12:47:15
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

我听五月天

木虫 (正式写手)

引用回帖:
4楼: Originally posted by BioChen at 2014-05-07 12:20:59
12孔板,每孔大概能提取到200ug左右的总蛋白,能跑1-2次western。

铺板后长到底面积%多少可以给药?我的药最高浓度可以使细胞存活率降到对照组的10%左右。谢谢
为爱而生
6楼2014-05-07 22:44:38
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

BioChen

银虫 (正式写手)

引用回帖:
6楼: Originally posted by 我听五月天 at 2014-05-07 22:44:38
铺板后长到底面积%多少可以给药?我的药最高浓度可以使细胞存活率降到对照组的10%左右。谢谢...

非常抱歉,我没有做过药理方面的研究,无法给您回答。
7楼2014-05-08 09:22:27
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

我听五月天

木虫 (正式写手)

引用回帖:
2楼: Originally posted by gyesang at 2014-05-07 00:37:33
24孔板最后收的蛋白样品比较少,鉴于你分组比较多,你可以用12孔做,每个孔铺大约20万个细胞,细胞长至90%做处理

谢谢~我做96孔板都是长到30%-50%给药孵育48h,90%给药会不会太晚了?您说的处理是最后裂解提取吗?给药后我的最高浓度组存活率可能只是对照组的10%,这样的细胞量能提取足够的东西吗?
为爱而生
8楼2014-05-08 09:35:38
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

我听五月天

木虫 (正式写手)

引用回帖:
3楼: Originally posted by sunrq516516 at 2014-05-07 07:47:40
12孔我觉得是极限了,一般我们会做6孔板

谢谢,做6孔板的话那您一个组做一个孔?还是?
为爱而生
9楼2014-05-08 09:37:14
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

我听五月天

木虫 (正式写手)

引用回帖:
2楼: Originally posted by gyesang at 2014-05-07 00:37:33
24孔板最后收的蛋白样品比较少,鉴于你分组比较多,你可以用12孔做,每个孔铺大约20万个细胞,细胞长至90%做处理

啊,还有做12孔板的话每组只做1个孔的话可以吗?
为爱而生
10楼2014-05-08 09:39:11
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 我听五月天 的主题更新
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 范进中举一文的中心思想 +8 炎黄贵胄 2026-08-22 9/450 2026-08-26 07:47 by WASM
[基金申请] 2026国自然函评费到账 +21 羊腰板 2026-08-21 24/1200 2026-08-26 07:20 by finnigan
[考研] 售SCI一区T0P文章,我:8.O.55.1.O.5.4,科目全,可+急 +3 7K1CJE38xLG4 2026-08-25 5/250 2026-08-26 07:17 by cNXvBfCpiZOM
[基金申请] 2026年8月25日国自然放榜前突然收到列入评审专家邮件,有关系吗? +22 木水思豆 2026-08-25 25/1250 2026-08-26 07:16 by jklily
[考博] 售SCI一区T0P文章,我:8.O.55.1.O.5.4,科目全,可+急 +3 Qj98d49dHFb9 2026-08-25 5/250 2026-08-26 04:57 by cNXvBfCpiZOM
[论文投稿] 售SCI一区T0P文章,我:8O.55.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +3 7K1CJE38xLG4 2026-08-25 4/200 2026-08-26 02:04 by cNXvBfCpiZOM
[基金申请] 今天务委会开完了,明天出结果吗 +18 angus9576 2026-08-25 22/1100 2026-08-26 00:41 by merchancy
[基金申请] 在坚冰还盖着北海的时候,我看到了怒放的梅花。 (金币+10) +6 ziyangfang 2026-08-25 9/450 2026-08-25 20:26 by huagongfeihu
[基金申请] 明天应该可查了!? +6 chengyan1220 2026-08-23 6/300 2026-08-25 19:45 by zfd97
[基金申请] 有没有大神帮我看看基金代码 28+4 1234567wang 2026-08-24 10/500 2026-08-25 19:15 by lfy8008
[基金申请] 如果此刻你正在为国基感到焦虑,不妨来听听这首《基金之外》 +8 scalable 2026-08-24 8/400 2026-08-25 12:52 by jnhyjjm
[基金申请] 没有任何消息-是不是就凉了 +9 图啦图啦 2026-08-24 10/500 2026-08-25 11:59 by 南海小哥
[基金申请] 今天基金会出结果吗?20260819 +17 kkkl_v 2026-08-19 18/900 2026-08-25 09:41 by windflowerwy
[基金申请] 我面上完蛋了 +13 且听虎啸 2026-08-20 14/700 2026-08-25 09:10 by mrkang
[基金申请] filecode,4个jtjc了 +14 ziyangfang 2026-08-19 17/850 2026-08-24 18:37 by 哈哈蛤?
[基金申请] 建议基金发布提前给出明确的时间点 +13 kulium 2026-08-21 16/800 2026-08-24 16:27 by superceng
[基金申请] 让我中一个面上吧! +13 大萍1987 2026-08-20 16/800 2026-08-24 10:23 by 太傻了
[基金申请] 看来今天不会放榜了? +8 chengyan1220 2026-08-21 11/550 2026-08-21 17:52 by dcqxinyang
[基金申请] 应该是下周三26日公布了吧? +4 哈哈蛤? 2026-08-21 4/200 2026-08-21 10:58 by Vivilian
[基金申请] 今天放榜没戏了吧 +9 yuleib84 2026-08-19 11/550 2026-08-21 10:06 by gltch
信息提示
请填处理意见