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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 细胞科学 » 要做western blot的话应该用24孔板还是什么？
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我听五月天

木虫 (正式写手)

[求助] 要做western blot的话应该用24孔板还是什么？

如题，实验设计是这样的样品1有9个浓度、样品2有一个浓度、样品2+样品1（9个）、空白组，也就是大概20个组。因为没做过所以不知道样细胞要达到多少才可以做western blot？用24孔板一孔一个组的话得到的最后细胞裂解物的量够用否？
话说24孔板一孔应该放多少细胞来铺板，是不是跟96孔板密度要求应该一样啊？每孔的培养基又该给多少？
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1楼 2014-05-06 22:31:00
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gyesang

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我听五月天: 金币+5, ★★★很有帮助 2014-05-07 22:41:32
24孔板最后收的蛋白样品比较少，鉴于你分组比较多，你可以用12孔做，每个孔铺大约20万个细胞，细胞长至90%做处理
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学术问题讨论咨询发邮件gyesang@163.com
2楼2014-05-07 00:37:33
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gyesang

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silicare: 金币+3, 应助指数+1, 谢谢参与 2014-06-11 10:55:09
引用回帖:
8楼: Originally posted by 我听五月天 at 2014-05-08 09:35:38
谢谢~我做96孔板都是长到30%-50%给药孵育48h，90%给药会不会太晚了？您说的处理是最后裂解提取吗？给药后我的最高浓度组存活率可能只是对照组的10%，这样的细胞量能提取足够的东西吗？...

"给药后我的最高浓度组存活率可能只是对照组的10%，你需要处理48h"
如果是这样的话，建议你用6孔板做，细胞长至70%左右的时候，开始加药处理，48h后收样，每个处理只用一个孔是没有问题的
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学术问题讨论咨询发邮件gyesang@163.com
11楼2014-05-08 15:25:03
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