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katrina_yao

铁虫 (初入文坛)

[求助] 求助:Pml I 和Sfi I 的酶切位点和保护碱基

本人最近设计引物,扩增cDNA,想在目的基因上加上Pml I 和Sfi I双酶切位点。用的是invitrogen的pPICZ载体。想请教各位老师,这两个酶的保护碱基怎么确定,还有在设计引物时,上游用Pml I 是从5'到3',下游用Sfi I要用3‘到5’序列吗?求高手指点,感激不尽啊~~~
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