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请教钙蛋白酶酶活的计算问题。
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Calpain活性测定 将待测样品经适度稀释后，取样品0.5ml，加1.5ml反应混合液(100mMTris、10mMMCE、5mg/mlCasein-Hamrnerstein，用醋酸调pH至7.5)，反应以添加150μl 0.1M CaCl2开始，以添加150μl 0.2M EDTANa2为对照，反应(25℃,60min)，后加2m1 5%三氯乙酸终止反应，离心(4,000×gmax、30min)，测上清在278nm处的吸光度，所得值即为酶活单位。 一个单位的Calpain活性定义为25℃，反应60min，在278nm下，增加1.0吸光值单位催化反应所需酶的量。 已测定其相关吸光度A值以及其蛋白浓度mg/ml。 曾经看过相关文献上其酶活用U来表示，但不知道U是如何计算出来的？。还有些文献上用Μ/ml来表示其活性，依然不知道是如何计算的？？。 |
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求助酶的Kcat 计算！
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