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hanzhinan

木虫 (正式写手)

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[求助] 关于比酶活的计算

最近在做关于酶活的实验，求助一个当计算出酶活后，有个比酶活，不知道是怎么定义的。比如看到的一篇文章里是这么描述的，U/ug protein。这个是如何计算的呢？

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1楼2012-01-08 10:26:14

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rtt0325

银虫 (小有名气)

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【答案】应助回帖

★ ★
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amisking(金币+2): 鼓励发帖交流！ 2012-01-08 19:32:44
hanzhinan(金币+1): ★★★★★最佳答案 2012-01-09 09:49:13

比活力就是你测完酶活力之后，用酶活力除以你的蛋白量，常用的单位就是U/mg，就是每毫克蛋白的酶活力，就是比活力

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2楼2012-01-08 17:08:09

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jinpeng_6118

木虫 (正式写手)

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【答案】应助回帖

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hanzhinan(金币+1): ★有帮助 2012-01-09 09:49:50

我有一个计算脂肪酶比活力的例子，你可以参考下，除了摩尔吸光系数不同外，其他的都一样了。
利用分光光度计法pNPB测脂肪酶活性，酶比活计算公式如下：
Beer定律的数学表达式为A=kbc，
摩尔吸光系数：公式A=kbc中的以为1mol/L,b为1cm时，则系数k称为摩尔吸光系数，以ε表示，单位为升/（摩尔•厘米）[L/(mol•cm）]，A=kbc可写成A=εc。
A:吸光值
c：pNP浓度    mol/L
ε：摩尔吸光系数
t：时间          min
V：反应体系体积 L
△       M：pNP生成总量单位mol
我们的b=1cm
因而公式：A=cε
所以我们测得的动力学曲线斜率△A/t=ε△c/t=ε△M/tV
△M/t=△A V /tε  。△M/t：每分钟PNP的生成（mol/min），等同于每分钟pNPB的分解量
1个酶活力单位定义为1分钟水解底物生成1μmol对硝基苯酚(胺)所需要的酶量
所以酶比活计算公式：U/mg=10（6次方）x△A V /tεM=10（6次方）x K V/εM
      K为斜率，M为酶的加入量（单位mg），V为测定时的体积（L），ε：摩尔吸光系数0.016×106 L/(mol•cm)

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