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hanzhinan木虫 (正式写手)
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[求助]
关于比酶活的计算
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| 最近在做关于酶活的实验，求助一个当计算出酶活后，有个比酶活，不知道是怎么定义的。比如看到的一篇文章里是这么描述的，U/ug protein。这个是如何计算的呢？ |
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rtt0325
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5楼2012-01-09 14:46:24
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2楼2012-01-08 17:08:09
jinpeng_6118
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【答案】应助回帖
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hanzhinan(金币+1): ★有帮助 2012-01-09 09:49:50
hanzhinan(金币+1): ★有帮助 2012-01-09 09:49:50
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我有一个计算脂肪酶比活力的例子，你可以参考下，除了摩尔吸光系数不同外，其他的都一样了。 利用分光光度计法pNPB测脂肪酶活性，酶比活计算公式如下： Beer定律的数学表达式为A=kbc， 摩尔吸光系数：公式A=kbc中的以为1mol/L,b为1cm时，则系数k称为摩尔吸光系数，以ε表示，单位为升/（摩尔•厘米）[L/(mol•cm）]，A=kbc可写成A=εc。 A:吸光值 c：pNP浓度 mol/L ε：摩尔吸光系数 t：时间 min V：反应体系体积 L △ M：pNP生成总量 单位mol 我们的b=1cm 因而公式：A=cε 所以我们测得的动力学曲线斜率△A/t=ε△c/t=ε△M/tV △M/t=△A V /tε 。△M/t：每分钟PNP的生成（mol/min），等同于每分钟pNPB的分解量 1个酶活力单位定义为1分钟水解底物生成1μmol对硝基苯酚(胺)所需要的酶量 所以酶比活计算公式：U/mg=10（6次方）x△A V /tεM=10（6次方）x K V/εM K为斜率，M为酶的加入量（单位mg），V为测定时的体积（L），ε：摩尔吸光系数0.016×106 L/(mol•cm) |
3楼2012-01-08 22:41:54
hanzhinan
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4楼2012-01-09 09:49:41
