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hanzhinan

木虫 (正式写手)

[求助] 关于比酶活的计算

最近在做关于酶活的实验,求助一个当计算出酶活后,有个比酶活,不知道是怎么定义的。比如看到的一篇文章里是这么描述的,U/ug protein。这个是如何计算的呢?
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jinpeng_6118

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

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hanzhinan(金币+1): 有帮助 2012-01-09 09:49:50
我有一个计算脂肪酶比活力的例子,你可以参考下,除了摩尔吸光系数不同外,其他的都一样了。
利用分光光度计法pNPB测脂肪酶活性,酶比活计算公式如下:
Beer定律的数学表达式为A=kbc,
摩尔吸光系数:公式A=kbc中的以为1mol/L,b为1cm时,则系数k称为摩尔吸光系数,以ε表示,单位为升/(摩尔•厘米)[L/(mol•cm)],A=kbc可写成A=εc。
A:吸光值
c:pNP浓度     mol/L
ε:摩尔吸光系数  
t:时间            min
V:反应体系体积    L
△        M:pNP生成总量 单位mol
我们的b=1cm
因而公式:A=cε
所以我们测得的动力学曲线斜率△A/t=ε△c/t=ε△M/tV
△M/t=△A V /tε  。△M/t:每分钟PNP的生成(mol/min),等同于每分钟pNPB的分解量
1个酶活力单位定义为1分钟水解底物生成1μmol对硝基苯酚(胺)所需要的酶量
所以酶比活计算公式:U/mg=10(6次方)x△A V /tεM=10(6次方)x K V/εM
         K为斜率,M为酶的加入量(单位mg),V为测定时的体积(L),ε:摩尔吸光系数0.016×106 L/(mol•cm)
人生百态原为海,看破红尘方为岸!
3楼2012-01-08 22:41:54
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rtt0325

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
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amisking(金币+2): 鼓励发帖交流! 2012-01-08 19:32:44
hanzhinan(金币+1): ★★★★★最佳答案 2012-01-09 09:49:13
比活力就是你测完酶活力之后,用酶活力除以你的蛋白量,常用的单位就是U/mg,就是每毫克蛋白的酶活力,就是比活力
2楼2012-01-08 17:08:09
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hanzhinan

木虫 (正式写手)

引用回帖:
: Originally posted by rtt0325 at 2012-01-08 17:08:09:
比活力就是你测完酶活力之后,用酶活力除以你的蛋白量,常用的单位就是U/mg,就是每毫克蛋白的酶活力,就是比活力

也就是还要测定你酶液的蛋白质含量是吗?
4楼2012-01-09 09:49:41
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rtt0325

银虫 (小有名气)

引用回帖:
4楼: Originally posted by hanzhinan at 2012-01-09 09:49:41:
也就是还要测定你酶液的蛋白质含量是吗?

是的,比活力是需要测定蛋白含量的
5楼2012-01-09 14:46:24
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