应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » 荧光定量PCR阴性对照P出了目的条带
北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
51/1返回列表
查看: 3391  |  回复: 14
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

摩羯的心

铁虫 (小有名气)

[求助] 荧光定量PCR阴性对照P出了目的条带 已有3人参与

各位虫友，我做绝对定量，以质粒为模板，设置了阴性对照，CT值与样品的很接近，跑电泳结果竟然有目的条带，这是怎么回事啊？因为我引物的特殊性是要区分基因突变型，因此引物中引入了错配碱基，所以做PCR的酶必须不具有3'-5'外切酶活性，现在用的是伯乐的盒子，适合iQ5机型，大家给推荐比较好用的做荧光定量的试剂盒吧？还有有没有人用普通PCR试剂，只是里面加入荧光染料，做荧光定量的，这样可行吗？大家帮帮忙吧  实验遇见瓶颈了
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2014-04-26 10:22:27
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

jurkat.1640

至尊木虫 (文坛精英)
用什么做的阴性对照？
赞一下 回复此楼
10楼2014-05-05 10:10:28
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 15 个回答

yb19841014

铁杆木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
摩羯的心(kx444555代发): 金币+2, 鼓励交流 2014-04-29 08:40:14
把试剂，引物，模板重新换新的吧  估计是被污染了啊  我们实验室现在用的是vazyme的 Qmix  还不错
赞一下 回复此楼
2楼2014-04-27 21:56:29
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

摩羯的心

铁虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by yb19841014 at 2014-04-27 21:56:29
把试剂，引物，模板重新换新的吧  估计是被污染了啊  我们实验室现在用的是vazyme的 Qmix  还不错

我把引物 模板都换成新的了 还是如此啊  而且试剂 也是刚开始用的
赞一下 回复此楼
3楼2014-04-28 08:22:41
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zhangyunjing

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
kx444555: 金币+2, 鼓励交流 2014-04-29 08:40:18
按照这种情况的话，很有可能是气溶胶污染了，也就是环境污染了，换个实验环境试试。荧光定量法进行基因突变检测时，染料法需要采用饱和染料，比如EvaGreen，探针法就无需加入荧光染料了
赞一下 回复此楼
rainwater
4楼2014-04-28 11:54:17
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 15 个回答
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 293求调剂 +3 末未mm 2026-03-30 5/250 2026-03-30 17:23 by 王保杰33
[考研] 材料科学与工程 317求调剂 +5 JKSOIID 2026-03-26 5/250 2026-03-30 16:38 by 梨子～
[考研] 324求调剂 +9 hanamiko 2026-03-26 11/550 2026-03-30 14:27 by JourneyLucky
[考研] 0703化学 +14 妮妮ninicgb 2026-03-27 14/700 2026-03-30 12:46 by fangnagu
[基金申请] 面上5B能上会吗？ +7 redcom 2026-03-29 7/350 2026-03-30 12:44 by 爱搞研究的小孩
[考研] 0703本科郑州大学求调剂 +7 nhj_ 2026-03-25 7/350 2026-03-30 12:44 by fangnagu
[考研] 生物技术与工程 +7 1294608413 2026-03-25 8/400 2026-03-30 11:36 by 唐沐儿
[考研] 337求调剂 +6 《树》 2026-03-29 6/300 2026-03-30 10:15 by herarysara
[考研] 298求调剂 +3 种圣赐 2026-03-29 3/150 2026-03-29 12:06 by longlotian
[考研] 305求调剂 +8 RuiFairyrui 2026-03-28 8/400 2026-03-29 08:22 by fmesaito
[考研] 求调剂 +7 争取九点睡 2026-03-28 8/400 2026-03-28 21:07 by 争取九点睡
[考研] 315求调剂 +4 akie... 2026-03-28 5/250 2026-03-28 21:05 by zhq0425
[考研] 本科新能源科学与工程，一志愿华理能动285求调剂 +7 AZMK 2026-03-28 11/550 2026-03-28 21:01 by xxxsssccc
[考研] 085701环境工程，267求调剂 +16 minht 2026-03-26 16/800 2026-03-28 12:16 by zllcz
[考研] 调剂 +3 好好读书。 2026-03-28 3/150 2026-03-28 12:04 by 王保杰33
[考研] 315分求调剂 +7 26考研上岸版26 2026-03-26 7/350 2026-03-28 04:05 by fmesaito
[考研] 考研调剂 +9 小蜡新笔 2026-03-26 9/450 2026-03-27 11:10 by 不吃魚的貓
[考研] 286求调剂 +4 lim0922 2026-03-26 4/200 2026-03-27 10:28 by guoweigw
[考研] 生物学学硕求调剂 +7 小羊睡着了? 2026-03-23 10/500 2026-03-25 02:24 by 清风拂扬。 m
[考研] 材料考研调剂生 +3 黄粱一梦千年 2026-03-24 3/150 2026-03-24 17:00 by barlinike
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭