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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 核酸提取 » 本人目前遇到连接问题
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JICK159

木虫 (正式写手)

[求助] 本人目前遇到连接问题 已有7人参与

本人目前遇到连接问题，载体为枯草pp43nmk 6800bp，基因约1600bp，连接后跑胶多为一万以上的条带，转化后一点都不长，怎么破
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1楼 2014-04-25 15:43:00
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JICK159

木虫 (正式写手)
引用回帖:
8楼: Originally posted by zkz38210098 at 2014-04-27 09:41:29
你选的是那两个酶切位点。载体双酶切完全吗？

应该完全，切后基本只有两条带，一条是原来就有的基因890bp，还有就是质粒6800bp，酶切是用buffer r pstI和hindIII
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9楼2014-04-27 12:17:55
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Neo2000

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
JICK159(西门吹雪170代发): 金币+1, 鼓励回帖交流 2014-04-25 18:50:15
连接以后不需要跑胶啊，直接转化，你这个情况应该就是一次就能连上的啊。你说说你是怎么做的吧

[ 发自小木虫客户端 ]
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2楼2014-04-25 17:28:42
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JICK159

木虫 (正式写手)
引用回帖:
2楼: Originally posted by Neo2000 at 2014-04-25 17:28:42
连接以后不需要跑胶啊，直接转化，你这个情况应该就是一次就能连上的啊。你说说你是怎么做的吧

我连接后转化一直不长，我去跑胶试试，结果发现时一条大于一万条带
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3楼2014-04-25 18:13:48
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jonew

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
你链接了多少？还跑胶？把所有的连接产物全部加进去转化，就出来了，另外，如果12h没有斑，就多长几天，，，，
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借口很贱，，，
4楼2014-04-25 18:15:38
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