24小时热门版块排行榜    

查看: 1273  |  回复: 1

zhaowenjuan

新虫 (小有名气)

[求助] TA克隆如何操作? 已有1人参与

大家好!我是第一次做TA克隆,很多东西不是很熟悉,有一些问题请教,希望能得到各位的解答,谢谢!
我选用的是pMD19-T载体,买的是takara公司的,看到上面带有Control Insert,不是很清楚它的作用,感受态准备用DH5a,筛选条件用amp抗性可不可以?培养基是不是可以用LB?不做蓝白斑筛选可以么?对于之后阳性克隆的验证,只做菌落PCR验证,不进行酶切验证而送去测序可以么?
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

梅花香自苦寒来
已阅   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

snmrna

铁杆木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★
zhaowenjuan(gyesang代发): 金币+2, 鼓励回帖交流! 2014-07-15 21:39:30
control insert是作为阳性对照的,看你的目的基因是否有问题的;AMP抗性可以,培养基就是LB,蓝白斑筛选能做就做吧。我都是做质粒快检,看质粒的位置,我做的时候菌落PCR容易出现假阳性,测序结果表明质粒快检呈阳性的大多是正确的克隆子
2楼2014-06-30 10:31:36
已阅   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 zhaowenjuan 的主题更新
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 0856调剂 +7 刘梦微 2026-02-28 7/350 2026-03-02 14:11 by liyongv
[考研] 282求调剂 +4 2103240126 2026-03-02 5/250 2026-03-02 13:45 by littlehu66
[考研] 材料学硕318求调剂 +9 February_Feb 2026-03-01 9/450 2026-03-02 13:31 by njzyff
[考研] 276求调剂 +4 路lyh123 2026-02-28 5/250 2026-03-02 11:20 by yuchj
[考研] 材料工程专硕283求调剂 5+4 ,!? 2026-03-02 6/300 2026-03-02 11:07 by 黑!在干嘛
[考研] 284求调剂 +10 天下熯 2026-02-28 11/550 2026-03-02 11:03 by 无际的草原
[考研] 0856材料与化工,270求调剂 +8 YXCT 2026-03-01 9/450 2026-03-02 11:01 by 无际的草原
[考研] 264求调剂 +4 巴拉巴拉根556 2026-02-28 4/200 2026-03-02 10:48 by yuchj
[考研] 0854复试调剂 276 +4 wmm9 2026-03-01 6/300 2026-03-02 09:28 by 热情沙漠
[考研] 材料学调剂 +10 提神豆沙包 2026-02-28 12/600 2026-03-02 09:26 by 李老师!
[考研] 279求调剂 +3 dua1 2026-03-01 4/200 2026-03-02 00:23 by 大脸蛋子
[基金申请] 本子写完了,给DS兄弟看了,得了92分 +3 Doma 2026-03-01 7/350 2026-03-02 00:00 by jnzsy
[硕博家园] 博士自荐 +7 科研狗111 2026-02-26 11/550 2026-03-01 22:24 by 哲平L
[考博] 26申博 +4 想申博! 2026-02-26 6/300 2026-03-01 17:32 by 想申博!
[考研] 313求调剂 +3 水流年lc 2026-02-28 3/150 2026-03-01 16:01 by 新能源达人
[考研] 304求调剂 +6 曼殊2266 2026-02-28 7/350 2026-03-01 15:14 by wjLi2017
[考研] 课题组接收材料类调剂研究生 +3 gaoxiaoniuma 2026-02-28 4/200 2026-03-01 14:30 by jjj三跨
[考研] 298求调剂 +9 人间唯你是清欢 2026-02-28 12/600 2026-03-01 14:23 by Ducount.Y
[考博] 博士自荐 +4 kkluvs 2026-02-28 4/200 2026-03-01 10:19 by 馥安馥安
[硕博家园] 【博士招生】太原理工大学2026化工博士 +4 N1ce_try 2026-02-24 8/400 2026-02-26 08:40 by N1ce_try
信息提示
请填处理意见