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温派斯

新虫 (初入文坛)

[求助] 定点突变 引物设计 不会啊 求助 求助 已有3人参与

aagaccccgg cctgggaccc tgagaagcct agccgcagct acag(a)cgagcg cgactttgag tttcaccggc acacatccca ccacacccat cacccgc
已经构建好的质粒做定点突变啊  要把 G突变成括号里的  A  不会设计引物啊   求助
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1楼 2014-03-25 13:24:43
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wangranjun

荣誉版主 (知名作家)

广庭之惘然

优秀版主

【答案】应助回帖

在要突变的碱基左右各选十个碱基长度（差不多全长21bp），然后再加两端引物，一共两对引物。F端与cgcagct acag(a)cgagcg cgactt为一对，R端与此段反向引物为一对，各自PCR，产物再用F、R引物融合一下就好了……
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他日扬翼九万里，历大千世界，定我红尘心！
4楼2014-05-13 15:26:23
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1033136241

银虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
直接把g换成a，然后用构建好的质粒pcr就可以把
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2楼2014-03-27 14:30:38
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xufang7763

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

将突变点设计在整条引物的中间，长度大概在30-40bp!
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人生就像赌博，有输有赢！
3楼2014-05-06 15:45:01
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