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北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
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seven拂晓

新虫 (初入文坛)

[求助] 有关浓缩质粒的问题 已有5人参与

我前几天收到别的学校的老师给寄的质粒,是滴在滤纸上的那种。我把它剪碎之后,用75微升的双蒸水洗脱下来。昨天做的转化,可是一个平板上才长了两个菌落,所以,我想把它浓缩一下。
    可不可以把这75微升的质粒溶液滴在提质粒用的柱子上,然后吹干,再用20微升的水洗脱啊,这样做,质粒的损失会不会很大?
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gyesang

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引用回帖:
5楼: Originally posted by seven拂晓 at 2014-03-23 23:50:00
抽质粒怎么可以看出来是不是我想要的...

不会,你想要的什么质粒都不知道吧,方法有很多啊,酶切,测序都可以啊
学术问题讨论咨询发邮件gyesang@163.com
8楼2014-03-24 16:25:26
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pennchem

专家顾问 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2014-03-23 11:50:32
seven拂晓: 金币+1 2014-03-23 23:51:53
这样做的话,损失会很大,如果你可以找到一个speed-vac的东西,旋转然后蒸发。

或者你可以用乙醇沉淀的方法。
行至水穷处,坐看云起时
2楼2014-03-23 10:56:11
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gyesang

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【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
seven拂晓: 金币+4 2014-03-24 19:59:57
长两个菌落,已经足够你用了啊,你把那两个菌落培养上,然后抽质粒看看是不是你想要的,如果是了,就OK了,如果不是,再重新转化,用效率高些的感受态来做转化
学术问题讨论咨询发邮件gyesang@163.com
3楼2014-03-23 14:37:09
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wangpeng227

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
seven拂晓: 金币+1 2014-03-23 23:51:34
seven拂晓: 金币+2 2014-03-24 19:59:27
gyesang: 金币+2, 鼓励回帖交流! 2014-03-31 19:53:46
两个克隆都有一个是对的就够了。

如果要浓缩的话,不需要柱子,只需要放在37摄氏度烘箱,放上一会儿,水分就蒸发了,短时间的温育不影响质粒的。
4楼2014-03-23 20:44:36
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