应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 氯霉素提高pcDNA3.1(+)质粒拷贝数，可行？
251/3返回列表123下一页
查看: 2743  |  回复: 24
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

btx362237729

金虫 (正式写手)

[求助] 氯霉素提高pcDNA3.1(+)质粒拷贝数，可行？

因为做的是DNA疫苗，每只动物要用100ug质粒，浓度要达到1ug/ul

但是目前用试剂盒提取的质粒浓度最大只能达到0.116ug/ul（洗脱50ul），当然这个是没浓缩前的，浓缩还是很随意的。

算了一下，要用掉好多试剂盒呢

请问大家，用氯霉素增加pcDNA3.1(+)的拷贝数可行吗?效果怎么样？pcDNA3.1(+)应该是松弛型质粒。
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
人生最黑暗的时光终于过去了
1楼 2012-09-26 11:52:40
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
从你的回收量看，你用的是小量质粒提取试剂盒。而从你的要求来看，你应该使用大规模质粒提取试剂盒。用QIAGEN maxi或者mega。
赞一下 回复此楼
2楼2012-09-26 13:30:47
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

junminh

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
小丹木木: 金币+1, 鼓励交流 2012-09-26 14:40:10
这个是行不通的，只能用试剂盒或者浓缩了，我们用AXYGEN的中/大量试剂盒曾经提到过浓度超过1MG/UL，但是与质粒的烤贝数也有关系的。
赞一下 回复此楼
3楼2012-09-26 13:35:24
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

jl860822

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
建议使用大抽试剂盒，这个应该可以满足你的需要，用氯霉素提高拷贝数，这个没听过
赞一下 回复此楼
4楼2012-09-26 14:18:37
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

gwd0312

木虫 (正式写手)

“无冕之王”

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
还没有听说过用某个抗生素可以提高拷贝数的！
赞一下 回复此楼
持之以恒、永不放弃！
5楼2012-09-26 16:08:30
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

dshlove

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
没听过这种方法啊。
你可以用质粒大提的方法去提质粒啊，反正你要的多，要是需要的话，我有我们自己做的步骤。
赞一下 回复此楼
6楼2012-09-26 16:13:49
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

btx362237729

金虫 (正式写手)
引用回帖:
5楼: Originally posted by gwd0312 at 2012-09-26 16:08:30
还没有听说过用某个抗生素可以提高拷贝数的！

囧 怎么都没听说过呢，分子克隆上的经典方法啊
赞一下 回复此楼
人生最黑暗的时光终于过去了
7楼2012-09-26 20:51:15
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

btx362237729

金虫 (正式写手)
引用回帖:
6楼: Originally posted by dshlove at 2012-09-26 16:13:49
没听过这种方法啊。
你可以用质粒大提的方法去提质粒啊，反正你要的多，要是需要的话，我有我们自己做的步骤。

是试剂盒吗？不会是手提吧谢谢回帖
赞一下 回复此楼
人生最黑暗的时光终于过去了
8楼2012-09-26 20:52:23
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

huiee

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
P1 P2 P3的方法大量提 简单快速浓度高
赞一下 回复此楼
9楼2012-09-27 03:19:24
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

我倒是听说过这个方法。不过从来没有试过，效果怎么样不得而知。我认为就是用大规模制备纯化质粒就行了，也不麻烦啊。
赞一下 回复此楼
10楼2012-09-27 07:33:35
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 btx362237729 的主题更新
251/3返回列表123下一页
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 268求调剂 +3 简单点0 2026-03-17 3/150 2026-03-17 23:15 by wangjihu
[基金申请] 被我言中：新模板不强调格式了，假专家开始管格式了 +4 beefly 2026-03-14 4/200 2026-03-17 22:04 by 黄鸟于飞Chao
[考研] 304求调剂 +8 小熊joy 2026-03-14 8/400 2026-03-17 17:29 by ruiyingmiao
[考研] 308求调剂 +4 是Lupa啊 2026-03-16 4/200 2026-03-17 17:12 by ruiyingmiao
[考研] 化学工程321分求调剂 +11 大米饭！ 2026-03-15 14/700 2026-03-17 17:11 by ruiyingmiao
[考研] 材料专硕326求调剂 +6 墨煜姒莘 2026-03-15 7/350 2026-03-17 17:10 by ruiyingmiao
[考研] 274求调剂0856材料化工 +13 z2839474511 2026-03-11 14/700 2026-03-17 16:51 by share_joy
[考研] 271求调剂 +12 生如夏花… 2026-03-11 14/700 2026-03-17 10:56 by lovewei0727
[硕博家园] 深圳大学硕士招生（2026秋，传感器方向，仅录取第一志愿） +4 xujiaoszu 2026-03-11 9/450 2026-03-17 10:29 by xujiaoszu
[考研] 材料专硕274一志愿陕西师范大学求调剂 +5 薛云鹏 2026-03-13 5/250 2026-03-17 10:15 by Sammy2
[基金申请] 国自科面上基金字体 +6 iwuli 2026-03-12 7/350 2026-03-16 21:18 by sculhf
[考研] 环境工程调剂 +6 大可digkids 2026-03-16 6/300 2026-03-16 17:16 by barlinike
[考研] 283求调剂 +10 小楼。 2026-03-12 14/700 2026-03-16 16:08 by 13811244083
[考研] 294求调剂 +3 Zys010410@ 2026-03-13 4/200 2026-03-15 10:59 by zhq0425
[考研] 材料工程327求调剂 +3 xiaohe12w 2026-03-11 3/150 2026-03-14 20:20 by ms629
[考研] 复试调剂 +4 z1z2z3879 2026-03-14 5/250 2026-03-14 16:30 by JourneyLucky
[考研] 一志愿哈工大材料324分求调剂 +5 闫旭东 2026-03-14 5/250 2026-03-14 14:53 by 木瓜膏
[考研] 工科，求调剂 +3 我887 2026-03-11 3/150 2026-03-13 21:39 by JourneyLucky
[考研] 307求调剂 +5 超级伊昂大王 2026-03-12 5/250 2026-03-13 15:56 by 棒棒球手
[考研] 求调剂 +3 程雨杭 2026-03-12 3/150 2026-03-13 15:06 by JourneyLucky
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭