应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 氯霉素提高pcDNA3.1(+)质粒拷贝数，可行？
北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
251/3返回列表123下一页
查看: 2786  |  回复: 24
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

btx362237729

金虫 (正式写手)

[求助] 氯霉素提高pcDNA3.1(+)质粒拷贝数，可行？

因为做的是DNA疫苗，每只动物要用100ug质粒，浓度要达到1ug/ul

但是目前用试剂盒提取的质粒浓度最大只能达到0.116ug/ul（洗脱50ul），当然这个是没浓缩前的，浓缩还是很随意的。

算了一下，要用掉好多试剂盒呢

请问大家，用氯霉素增加pcDNA3.1(+)的拷贝数可行吗?效果怎么样？pcDNA3.1(+)应该是松弛型质粒。
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
人生最黑暗的时光终于过去了
1楼 2012-09-26 11:52:40
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
从你的回收量看，你用的是小量质粒提取试剂盒。而从你的要求来看，你应该使用大规模质粒提取试剂盒。用QIAGEN maxi或者mega。
赞一下 回复此楼
2楼2012-09-26 13:30:47
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

junminh

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
小丹木木: 金币+1, 鼓励交流 2012-09-26 14:40:10
这个是行不通的，只能用试剂盒或者浓缩了，我们用AXYGEN的中/大量试剂盒曾经提到过浓度超过1MG/UL，但是与质粒的烤贝数也有关系的。
赞一下 回复此楼
3楼2012-09-26 13:35:24
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

jl860822

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
建议使用大抽试剂盒，这个应该可以满足你的需要，用氯霉素提高拷贝数，这个没听过
赞一下 回复此楼
4楼2012-09-26 14:18:37
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

gwd0312

木虫 (正式写手)

“无冕之王”

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
还没有听说过用某个抗生素可以提高拷贝数的！
赞一下 回复此楼
持之以恒、永不放弃！
5楼2012-09-26 16:08:30
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

dshlove

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
没听过这种方法啊。
你可以用质粒大提的方法去提质粒啊，反正你要的多，要是需要的话，我有我们自己做的步骤。
赞一下 回复此楼
6楼2012-09-26 16:13:49
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

btx362237729

金虫 (正式写手)
引用回帖:
5楼: Originally posted by gwd0312 at 2012-09-26 16:08:30
还没有听说过用某个抗生素可以提高拷贝数的！

囧 怎么都没听说过呢，分子克隆上的经典方法啊
赞一下 回复此楼
人生最黑暗的时光终于过去了
7楼2012-09-26 20:51:15
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

btx362237729

金虫 (正式写手)
引用回帖:
6楼: Originally posted by dshlove at 2012-09-26 16:13:49
没听过这种方法啊。
你可以用质粒大提的方法去提质粒啊，反正你要的多，要是需要的话，我有我们自己做的步骤。

是试剂盒吗？不会是手提吧谢谢回帖
赞一下 回复此楼
人生最黑暗的时光终于过去了
8楼2012-09-26 20:52:23
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

huiee

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
P1 P2 P3的方法大量提 简单快速浓度高
赞一下 回复此楼
9楼2012-09-27 03:19:24
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

我倒是听说过这个方法。不过从来没有试过，效果怎么样不得而知。我认为就是用大规模制备纯化质粒就行了，也不麻烦啊。
赞一下 回复此楼
10楼2012-09-27 07:33:35
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 btx362237729 的主题更新
251/3返回列表123下一页
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 0703调剂 +14 拾玖壹 2026-04-04 16/800 2026-04-06 23:03 by chenzhimin
[考研] 085404 293求调剂 +4 勇远库爱314 2026-04-06 4/200 2026-04-06 22:32 by chenzhimin
[考研] 一志愿生物与医药，296分，求调剂 +11 66鹿 2026-04-03 13/650 2026-04-06 21:45 by 52305043001
[考研] 材料专硕(0856) 339分求调剂 +10 哈哈哈鹅哈哈哈 2026-04-05 10/500 2026-04-06 09:35 by jp9609
[考研] 301求调剂 +6 细胞相关蛋白 2026-04-02 10/500 2026-04-06 08:34 by jp9609
[考研] 0854电子信息319求调剂（接受跨专业调剂） +3 星星不眨眼喽 2026-04-05 3/150 2026-04-05 20:20 by 啵啵啵0119
[考研] 315求调剂 +5 ＆123456789 2026-04-05 5/250 2026-04-05 19:55 by nepu_uu
[考研] 348求调剂 +6 wukira 2026-04-04 6/300 2026-04-05 18:11 by 猪会飞
[考研] 275求调剂 +16 waltzh 2026-04-01 16/800 2026-04-05 17:14 by Hdyxbekcb
[考研] 一志愿北交大材料工程总分358求调剂 +6 cs0106 2026-04-05 6/300 2026-04-05 16:34 by imissbao
[考研] 290求调剂 +7 luoziheng 2026-04-04 7/350 2026-04-04 23:17 by lqwchd
[考研] 材料与化工306分找调剂 +23 沧海轻舟e 2026-04-02 27/1350 2026-04-04 21:52 by laoshidan
[考研] 316求调剂 +9 墨辰_Orion926 2026-04-04 9/450 2026-04-04 21:35 by lbsjt
[考研] 调剂 +9 19945159693 2026-04-03 10/500 2026-04-04 20:16 by dongzh2009
[考研] 求调剂：085600材料与化工，考材科基，总分319 +21 678lucky 2026-03-31 26/1300 2026-04-04 16:22 by dongzh2009
[考研] 五邑大学土木工程招调剂生2026 +3 wyutj 2026-03-31 4/200 2026-04-03 18:21 by zengxj_7201
[硕博家园] 求老师收留 +9 lllq123 2026-04-03 9/450 2026-04-03 13:48 by 呼吸都是减肥
[考研] 0805求调剂 +8 是水分 2026-03-31 8/400 2026-04-02 10:46 by guanxin1001
[考研] 322求调剂 +5 熹僖XX 2026-03-31 6/300 2026-04-02 10:08 by 求调剂zz
[考研] 348环境工程调剂 +3 吴彦祖24k 2026-04-01 3/150 2026-04-02 09:14 by nanaliuyun
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭