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wenrongti

新虫 (小有名气)

[求助] 细菌超声破碎之后,破碎液中的酶没有活性。 已有5人参与

我的菌在全细胞的时候,对我的底物是可以转化的,但是细菌超声破碎之后,对破碎液中的酶就行酶活测试,却发现对我的底物没有任何转化效果,这究竟是什么原因呢?我是直接在破碎液中就行酶活测试的,即用破碎液做参比,在离过心的稀释了一定倍数的破碎液中加入我的底物,然后在紫外进行全波段扫描,在20min内吸收曲线没有任何变化。而且如果破碎液不进行稀释的话,压根就没有吸收峰出现,这到底是什么原因???请教下大家~~
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l01240811

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
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wenrongti: 金币+3, ★★★很有帮助 2014-03-20 21:55:37
wenrongti: 金币+2, 有帮助 2014-03-20 22:01:13
可以电泳验证一下你的酶是否被降解,如果没有,那就是超声破碎时蛋白失活了,注意降低温度,缩短工作时间,或者选择其他温和的裂解方式
不管我活着,还是我死去,我都是一支牛虻,快乐地飞来飞去
10楼2014-03-20 13:23:08
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