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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 综合其他 » 【求助/交流】酵母菌体破碎
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dapaosheng

木虫 (著名写手)

[交流] 【求助/交流】酵母菌体破碎 已有16人参与

最近用酵母表达了一个蛋白，想用玻璃珠法使其破碎从而把蛋白提取出来，不知道哪里有直径为0.5mm的玻璃珠卖呢？价格大概是多少？有没有哪位大侠做过此类实验？能告诉我大概是怎么操作的吗？
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1楼 2010-07-24 22:46:20
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glidingwater

银虫 (小有名气)
★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
lstt09nk(金币+1):欢迎参与交流~~ 2010-07-25 09:19:28
将玻璃珠与菌液混一起在超声波中工作。
珠子的数量视菌液量而定。
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如果社会的黑暗侵蚀了学府，我该往何处？
2楼2010-07-25 08:39:13
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waiter

木虫 (著名写手)

蛋白纯化系统（国产AKTA）销售


★ ★
看天(金币+2):鼓励回答 星期天还不休息呢 2010-07-25 09:48:50
哦。都是实验性的小量做哦。
没做过。学习了。

以前接触的是高压匀质机。
太贵了。
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3楼2010-07-25 09:42:11
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zhaocy8903

木虫 (知名作家)
sigma
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4楼2010-07-25 10:42:42
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yushan3758

铁虫 (小有名气)

无
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
国外可以买到，不过我用的是机械震荡来破碎的！
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5楼2010-07-25 12:43:41
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henkally

禁虫 (著名写手)
★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
看天(金币+2):鼓励交流 2010-07-27 15:11:38
本帖内容被屏蔽
6楼2010-07-25 20:59:46
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susizheng

木虫 (著名写手)

我們是糖 甜到憂傷
★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
看天(金币+2):鼓励交流 2010-07-27 15:11:52
前段时间刚试验了下，1.5 mL菌液收集菌体（发酵24 h以上），100 uL细胞裂解液，加入玻璃珠，漩涡10S，冰上10S，重复10次，上清制样跑PAGE没问题。
大量提取的话可超声+漩涡配合使用。
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Thank-you，so-blue.
7楼2010-07-25 21:02:21
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姜大磊

木虫 (小有名气)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
引用回帖:
Originally posted by henkally at 2010-07-25 20:59:46:
我们实验室就做这个。玻璃珠是有卖的，SIGMA就有（不知道有无国产的）。还有要看楼主要多大粒径的玻璃珠，SIGMA至少有4种不同粒径的玻璃珠，玻璃珠还要分酸洗过的和未酸洗过的。还有，包装也差异很大，如果LZ实验 ...

感谢这位大哥！小弟借助宝地一用，想请教一下玻璃珠涡旋破碎之后，接着用什么方法提取蛋白的呢，我最近做的需要侧蛋白酶活，一直提取的量很少。
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Nevergiveup,neverslowdown;Nevergrowold,nevereverdieyoung......
8楼2010-07-26 18:24:24
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姜大磊

木虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by susizheng at 2010-07-25 21:02:21:
前段时间刚试验了下，1.5 mL菌液收集菌体（发酵24 h以上），100 uL细胞裂解液，加入玻璃珠，漩涡10S，冰上10S，重复10次，上清制样跑PAGE没问题。
大量提取的话可超声+漩涡配合使用。

感谢这位大哥！小弟借助宝地一用，想请教一下玻璃珠涡旋破碎之后，接着用什么方法提取蛋白的呢，我最近做的需要侧蛋白酶活，一直提取的量很少。
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Nevergiveup,neverslowdown;Nevergrowold,nevereverdieyoung......
9楼2010-07-26 18:26:08
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susizheng

木虫 (著名写手)

我們是糖 甜到憂傷
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
引用回帖:
Originally posted by 姜大磊 at 2010-07-26 18:26:08:

感谢这位大哥！小弟借助宝地一用，想请教一下玻璃珠涡旋破碎之后，接着用什么方法提取蛋白的呢，我最近做的需要侧蛋白酶活，一直提取的量很少。

因为我的蛋白有标签，直接挂柱子。
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Thank-you，so-blue.
10楼2010-07-26 18:30:48
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