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dapaosheng木虫 (著名写手)
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[交流]
【求助/交流】酵母菌体破碎 已有16人参与
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| 最近用酵母表达了一个蛋白，想用玻璃珠法使其破碎从而把蛋白提取出来，不知道哪里有直径为0.5mm的玻璃珠卖呢？价格大概是多少？有没有哪位大侠做过此类实验？能告诉我大概是怎么操作的吗？ |
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susizheng
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7楼2010-07-25 21:02:21
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10楼2010-07-26 18:30:48
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Breaking Buffer 50 mM sodium phosphate, pH 7.4 1 mM PMSF (phenylmethylsulfonyl fluoride or other protease inhibitors) 1 mM EDTA 5% glycerol 1. Prepare a stock solution of your desired protease inhibitors and store appropriately. Follow manufacturer's recommendations. 2. For 1 liter, dissolve in 900 ml deionized water: 6 g sodium phosphate (monobasic), 372 mg EDTA, and 50 ml glycerol 3. Use NaOH to adjust pH and bring up the volume to 1 liter. Store at 4°C. 4. Right before use, add the protease inhibitors. |
13楼2010-07-26 18:36:00
susizheng
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16楼2010-07-27 09:53:17