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dapaosheng

木虫 (著名写手)

[交流] 【求助/交流】酵母菌体破碎 已有16人参与

最近用酵母表达了一个蛋白,想用玻璃珠法使其破碎从而把蛋白提取出来,不知道哪里有直径为0.5mm的玻璃珠卖呢?价格大概是多少?有没有哪位大侠做过此类实验?能告诉我大概是怎么操作的吗?
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susizheng

木虫 (著名写手)

我們是糖 甜到憂傷


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
引用回帖:
Originally posted by 姜大磊 at 2010-07-26 18:34:15:

细胞裂解液是什么配方,能不能详细说一下步骤, 超声波破碎的时间及具体方法
邮箱:jiangdalei121121@163.com QQ:446394234

Breaking Buffer        50 mM sodium phosphate, pH 7.4
1 mM PMSF (phenylmethylsulfonyl fluoride or other protease inhibitors)
1 mM EDTA
5% glycerol
1.      Prepare a stock solution of your desired protease inhibitors and store
appropriately. Follow manufacturer's recommendations.  
2.      For 1 liter, dissolve in 900 ml deionized water:  
6 g sodium phosphate (monobasic), 372 mg EDTA, and 50 ml glycerol
3.      Use NaOH to adjust pH and bring up the volume to 1 liter. Store at 4°C.
4.      Right before use, add the protease inhibitors.
Thank-you,so-blue.
13楼2010-07-26 18:36:00
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glidingwater

银虫 (小有名气)

★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
lstt09nk(金币+1):欢迎参与交流~~ 2010-07-25 09:19:28
将玻璃珠与菌液混一起在超声波中工作。
珠子的数量视菌液量而定。
如果社会的黑暗侵蚀了学府,我该往何处?
2楼2010-07-25 08:39:13
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waiter

木虫 (著名写手)

蛋白层析系统(国产)销售


★ ★
看天(金币+2):鼓励回答 星期天还不休息呢 2010-07-25 09:48:50
哦。都是实验性的小量做哦。
没做过。学习了。

以前接触的是高压匀质机。
太贵了。
3楼2010-07-25 09:42:11
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yushan3758

铁虫 (小有名气)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
国外可以买到,不过我用的是机械震荡来破碎的!
5楼2010-07-25 12:43:41
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