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dapaosheng

木虫 (著名写手)

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[交流] 【求助/交流】酵母菌体破碎已有16人参与

最近用酵母表达了一个蛋白，想用玻璃珠法使其破碎从而把蛋白提取出来，不知道哪里有直径为0.5mm的玻璃珠卖呢？价格大概是多少？有没有哪位大侠做过此类实验？能告诉我大概是怎么操作的吗？

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1楼 2010-07-24 22:46:20

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姜大磊

木虫 (小有名气)

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引用回帖:

Originally posted by susizheng at 2010-07-25 21:02:21:
前段时间刚试验了下，1.5 mL菌液收集菌体（发酵24 h以上），100 uL细胞裂解液，加入玻璃珠，漩涡10S，冰上10S，重复10次，上清制样跑PAGE没问题。
大量提取的话可超声+漩涡配合使用。

感谢这位大哥！小弟借助宝地一用，想请教一下玻璃珠涡旋破碎之后，接着用什么方法提取蛋白的呢，我最近做的需要侧蛋白酶活，一直提取的量很少。